MDCK-SIAT1

Bunková línia MDCK-SIAT1 je modifikovaná verzia buniek Madin-Darbyho psej obličky (MDCK), ktorá je upravená tak, aby exprimovala vyššie hladiny ľudskej 2,6-sialyltransferázy (SIAT1). Tento enzým je zodpovedný za pridávanie kyseliny sialovej v alfa-2,6 väzbe na galaktózu na glykoproteínoch a glykolipidoch. Modifikácia sa vykonala s cieľom zvýšiť expresiu sialových kyselín viazaných na alfa-2,6, ktoré sú primárnymi receptormi pre ľudské chrípkové vírusy. Toto zvýšenie je veľmi dôležité, pretože vďaka nemu sa bunky MDCK-SIAT1 viac podobajú ľudskému epitelu dýchacích ciest, ktorý má prirodzene vysokú koncentráciu týchto receptorov. V dôsledku toho tieto bunky ponúkajú fyziologicky relevantnejší model na štúdium ľudských chrípkových vírusov a ich interakcií s potenciálnymi antivírusovými zlúčeninami.

Jedným z významných využití buniek MDCK-SIAT1 je hodnotenie citlivosti vírusu chrípky na inhibítory neuraminidázy (NAI), ako je napríklad oseltamivir. Vzhľadom na zvýšenú prítomnosť alfa-2,6-viazaných sialových kyselín vykazujú bunky MDCK-SIAT1 lepšiu citlivosť na NAI v porovnaní s nemodifikovanými bunkami MDCK. To z nich robí vynikajúci nástroj na zisťovanie rezistencie voči týmto inhibítorom, najmä u klinických izolátov ľudských chrípkových vírusov s nízkym počtom pasáží. Bunková línia MDCK-SIAT1 umožňuje presnejšie in vitro štúdie účinnosti liečiv a interakcií vírusových receptorov, čo poskytuje cenné poznatky o vývoji antivírusových terapií a mechanizmoch rezistencie.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

V spoločnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopnosťou našich produktov. Garantujeme, že naše bunky budú životaschopné na začiatku kultivácie počas 60 dní po odoslaní z našich zariadení. Zaručujeme, že všetky materiály zodpovedajú špecifikáciám opísaným v certifikáte analýzy a/alebo v produktovom liste

Úplné informácie nájdete v našom <a href=""/Kto sme/záruka/"" hreflang=""x-default"">Vyhlásení o záruke