MDCK-SIAT1

Linia komórkowa MDCK-SIAT1 jest zmodyfikowaną wersją komórek Madin-Darby Canine Kidney (MDCK), zaprojektowaną w celu ekspresji wyższych poziomów ludzkiej 2,6-sialylotransferazy (SIAT1). Enzym ten jest odpowiedzialny za dodawanie kwasu sialowego w wiązaniu alfa-2,6 do galaktozy na glikoproteinach i glikolipidach. Modyfikacja została przeprowadzona w celu zwiększenia ekspresji kwasów sialowych połączonych wiązaniem alfa-2,6, które są głównymi receptorami dla ludzkich wirusów grypy. To wzmocnienie ma kluczowe znaczenie, ponieważ sprawia, że komórki MDCK-SIAT1 są bardziej podobne do ludzkiego nabłonka dróg oddechowych, który naturalnie ma wysokie stężenie tych receptorów. W rezultacie komórki te oferują bardziej fizjologiczny model do badania ludzkich wirusów grypy i ich interakcji z potencjalnymi związkami przeciwwirusowymi.

Jednym z istotnych zastosowań komórek MDCK-SIAT1 jest ocena wrażliwości wirusa grypy na inhibitory neuraminidazy (NAI), takie jak oseltamiwir. Ze względu na zwiększoną obecność kwasów alfa-2,6-sialowych, komórki MDCK-SIAT1 wykazują zwiększoną wrażliwość na NAI w porównaniu do niezmodyfikowanych komórek MDCK. To sprawia, że są one doskonałym narzędziem do wykrywania oporności na te inhibitory, zwłaszcza w izolatach klinicznych ludzkich wirusów grypy o niskiej liczbie przejść. Linia komórkowa MDCK-SIAT1 pozwala na dokładniejsze badania in vitro skuteczności leków i interakcji receptorów wirusowych, zapewniając cenny wgląd w rozwój terapii przeciwwirusowych i mechanizmów oporności.

37°C, 5%_CO2, nawilżona atmosfera.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu

Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym