MDCK-SIAT1

La linea cellulare MDCK-SIAT1 è una versione modificata delle cellule Madin-Darby Canine Kidney (MDCK), ingegnerizzata per esprimere livelli più elevati di 2,6-sialiltransferasi umana (SIAT1). Questo enzima è responsabile dell'aggiunta di acido sialico in un legame alfa-2,6 al galattosio su glicoproteine e glicolipidi. La modifica è stata eseguita per aumentare l'espressione degli acidi sialici legati all'alfa-2,6, che sono i recettori primari per i virus dell'influenza umana. Questo miglioramento è fondamentale perché rende le cellule MDCK-SIAT1 più simili all'epitelio delle vie aeree umane, che presenta naturalmente un'elevata concentrazione di questi recettori. Di conseguenza, queste cellule offrono un modello fisiologicamente più rilevante per lo studio dei virus influenzali umani e delle loro interazioni con potenziali composti antivirali.

Una delle applicazioni significative delle cellule MDCK-SIAT1 è la valutazione della sensibilità del virus influenzale agli inibitori della neuraminidasi (NAI), come l'oseltamivir. Grazie alla maggiore presenza di acidi sialici legati all'alfa-2,6, le cellule MDCK-SIAT1 dimostrano una maggiore sensibilità ai NAI rispetto alle cellule MDCK non modificate. Ciò le rende uno strumento eccellente per rilevare la resistenza a questi inibitori, soprattutto negli isolati clinici a basso numero di passaggi dei virus influenzali umani. La linea cellulare MDCK-SIAT1 consente studi in vitro più accurati sull'efficacia dei farmaci e sulle interazioni con i recettori virali, fornendo preziose indicazioni sullo sviluppo di terapie antivirali e sui meccanismi di resistenza.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia