MDCK-SIAT1

Η κυτταρική σειρά MDCK-SIAT1 είναι μια τροποποιημένη έκδοση των κυττάρων Madin-Darby Canine Kidney (MDCK), που έχει τροποποιηθεί ώστε να εκφράζει υψηλότερα επίπεδα ανθρώπινης 2,6-σιαλυλτρανσφεράσης (SIAT1). Αυτό το ένζυμο είναι υπεύθυνο για την προσθήκη σιαλικού οξέος σε σύνδεση α-2,6 με γαλακτόζη σε γλυκοπρωτεΐνες και γλυκολιπίδια. Η τροποποίηση πραγματοποιήθηκε με σκοπό την αύξηση της έκφρασης των σιαλικών οξέων που συνδέονται με α-2,6, τα οποία αποτελούν τους πρωταρχικούς υποδοχείς για τους ιούς της ανθρώπινης γρίπης. Η ενίσχυση αυτή είναι κρίσιμη, καθώς καθιστά τα κύτταρα MDCK-SIAT1 πιο όμοια με το ανθρώπινο επιθήλιο των αεραγωγών, το οποίο έχει φυσικά υψηλή συγκέντρωση αυτών των υποδοχέων. Ως αποτέλεσμα, τα κύτταρα αυτά προσφέρουν ένα πιο φυσιολογικά σχετικό μοντέλο για τη μελέτη των ιών της ανθρώπινης γρίπης και των αλληλεπιδράσεών τους με πιθανές αντιιικές ενώσεις.

Μία από τις σημαντικές εφαρμογές των κυττάρων MDCK-SIAT1 είναι η αξιολόγηση της ευαισθησίας του ιού της γρίπης στους αναστολείς της νευραμινιδάσης (NAIs), όπως η οσελταμιβίρη. Λόγω της αυξημένης παρουσίας α-2,6-συνδεδεμένων σιαλικών οξέων, τα κύτταρα MDCK-SIAT1 επιδεικνύουν βελτιωμένη ευαισθησία στους NAIs σε σύγκριση με τα μη τροποποιημένα κύτταρα MDCK. Αυτό τα καθιστά ένα εξαιρετικό εργαλείο για την ανίχνευση της αντοχής σε αυτούς τους αναστολείς, ιδίως σε κλινικές απομονώσεις ιών της ανθρώπινης γρίπης με χαμηλό αριθμό διελεύσεων. Η κυτταρική σειρά MDCK-SIAT1 επιτρέπει ακριβέστερες in vitro μελέτες της αποτελεσματικότητας των φαρμάκων και των αλληλεπιδράσεων των ιικών υποδοχέων, παρέχοντας πολύτιμες πληροφορίες για την ανάπτυξη αντιιικών θεραπειών και μηχανισμών αντοχής.

37°C, 5%_CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

Στην Cytion, υποστηρίζουμε την ποιότητα και τη βιωσιμότητα των προϊόντων μας. Εγγυόμαστε ότι τα κύτταρά μας θα είναι βιώσιμα κατά την έναρξη της καλλιέργειας για 60 ημέρες μετά την αποστολή από τις εγκαταστάσεις μας. Διαβεβαιώνουμε ότι όλα τα υλικά συμμορφώνονται με τις προδιαγραφές που περιγράφονται στο Πιστοποιητικό Ανάλυσης ή/και στο Φύλλο Προϊόντος

Για πλήρεις λεπτομέρειες, ανατρέξτε στην <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Δήλωση εγγύησης