MDCK-SIAT1

MDCK-SIAT1-cellelinjen er en modificeret version af Madin-Darby Canine Kidney (MDCK)-cellerne, der er konstrueret til at udtrykke højere niveauer af human 2,6-sialyltransferase (SIAT1). Dette enzym er ansvarligt for tilføjelsen af sialinsyre i en alfa-2,6-binding til galactose på glykoproteiner og glykolipider. Modifikationen blev udført for at øge udtrykket af alfa-2,6-bundne sialinsyrer, som er de primære receptorer for humane influenzavirus. Denne forbedring er kritisk, da den gør MDCK-SIAT1-cellerne mere lig det menneskelige luftvejsepitel, som naturligt har en høj koncentration af disse receptorer. Som følge heraf tilbyder disse celler en mere fysiologisk relevant model til undersøgelse af humane influenzavirus og deres interaktioner med potentielle antivirale forbindelser.

En af de vigtigste anvendelser af MDCK-SIAT1-celler er vurderingen af influenzavirus' følsomhed over for neuraminidasehæmmere (NAI'er) som f.eks. oseltamivir. På grund af den øgede tilstedeværelse af alfa-2,6-bundne sialinsyrer udviser MDCK-SIAT1-cellerne forbedret følsomhed over for NAI'er sammenlignet med umodificerede MDCK-celler. Det gør dem til et fremragende værktøj til at påvise resistens over for disse inhibitorer, især i kliniske isolater af humane influenzavirus med lavt passageantal. MDCK-SIAT1-cellelinjen giver mulighed for mere nøjagtige in vitro-undersøgelser af lægemidlers effektivitet og virale receptorinteraktioner, hvilket giver værdifuld indsigt i udviklingen af antivirale terapier og resistensmekanismer.

37°C, 5%_CO2, befugtet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

Hos Cytion står vi inde for vores produkters kvalitet og levedygtighed. Vi garanterer, at vores celler vil være levedygtige ved kulturens start i 60 dage efter afsendelse fra vores faciliteter. Vi sikrer, at alle materialer er i overensstemmelse med de specifikationer, der er beskrevet i analysecertifikatet og/eller produktarket

For alle detaljer henvises til vores <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring