MDCK-SIAT1

MDCK-SIAT1-cellinjen är en modifierad version av Madin-Darby Canine Kidney (MDCK)-cellerna, konstruerade för att uttrycka högre nivåer av humant 2,6-sialyltransferas (SIAT1). Detta enzym är ansvarigt för tillsatsen av sialinsyra i en alfa-2,6-bindning till galaktos på glykoproteiner och glykolipider. Modifieringen utfördes för att öka uttrycket av alfa-2,6-länkade sialinsyror, som är de primära receptorerna för mänskliga influensavirus. Denna förstärkning är avgörande eftersom den gör MDCK-SIAT1-cellerna mer lika det mänskliga luftvägsepitelet, som naturligt har en hög koncentration av dessa receptorer. Som ett resultat erbjuder dessa celler en mer fysiologiskt relevant modell för att studera mänskliga influensavirus och deras interaktioner med potentiella antivirala föreningar.

Ett av de viktigaste användningsområdena för MDCK-SIAT1-celler är att bedöma influensavirusets känslighet för neuraminidashämmare (NAI), t.ex. oseltamivir. På grund av den ökade förekomsten av alfa-2,6-länkade sialinsyror uppvisar MDCK-SIAT1-cellerna en förbättrad känslighet för NAI:er jämfört med omodifierade MDCK-celler. Detta gör dem till ett utmärkt verktyg för att upptäcka resistens mot dessa hämmare, särskilt i kliniska isolat av humana influensavirus med lågt passagenummer. MDCK-SIAT1-cellinjen möjliggör mer exakta in vitro-studier av läkemedelseffektivitet och interaktioner mellan virusreceptorer, vilket ger värdefulla insikter i utvecklingen av antivirala behandlingar och resistensmekanismer.

37°C, 5%_CO2, befuktad atmosfär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

På Cytion står vi bakom våra produkters kvalitet och livskraft. Vi garanterar att våra celler är livsdugliga vid odlingens början i 60 dagar efter leverans från våra anläggningar. Vi försäkrar att allt material överensstämmer med de specifikationer som beskrivs i analyscertifikatet och/eller produktbladet

För fullständig information, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantiförklaring