MDCK-SIAT1

MDCK-SIAT1-solulinja on muunnettu versio Madin-Darby Canine Kidney (MDCK) -soluista, jotka on muunnettu ilmentämään suurempia määriä ihmisen 2,6-salyyttitransferaasia (SIAT1). Tämä entsyymi vastaa sialiinihapon lisäämisestä alfa-2,6-kytkennässä galaktoosiin glykoproteiineissa ja glykolipideissä. Muunnos tehtiin, jotta voitaisiin lisätä alfa-2,6-sidoksissa olevien sialiinihappojen ilmentymistä, jotka ovat ihmisen influenssavirusten ensisijaisia reseptoreita. Tämä lisäys on ratkaisevan tärkeää, koska se tekee MDCK-SIAT1-soluista samanlaisempia kuin ihmisen hengitysteiden epiteeli, jossa näitä reseptoreita on luonnostaan runsaasti. Näin ollen nämä solut tarjoavat fysiologisesti relevantin mallin ihmisen influenssavirusten ja niiden vuorovaikutuksen tutkimiseen mahdollisten viruslääkkeiden kanssa.

Yksi MDCK-SIAT1-solujen merkittävistä sovelluksista on influenssavirusten herkkyyden arviointi neuraminidaasin estäjille (NAI), kuten oseltamiviirille. Koska MDCK-SIAT1-solut sisältävät enemmän alfa-2,6-sidoksissa olevia sialiinihappoja, niiden herkkyys NAI:ille on parempi kuin muokkaamattomien MDCK-solujen. Tämä tekee niistä erinomaisen välineen resistenssin havaitsemiseen näitä inhibiittoreita vastaan, erityisesti ihmisen influenssavirusten kliinisissä isolaateissa, joiden läpivirtausluku on alhainen. MDCK-SIAT1-solulinjan avulla voidaan tehdä tarkempia in vitro -tutkimuksia lääkkeiden tehosta ja virusreseptorien vuorovaikutuksesta, mikä antaa arvokasta tietoa viruslääkehoitojen ja resistenssimekanismien kehittämisestä.

37 °C, 5 %_CO2, kostutettu ilmakehä.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia

Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa