MDCK-SIAT1

Клітинна лінія MDCK-SIAT1 - це модифікована версія клітин собачої нирки Мадіна-Дарбі (MDCK), сконструйована для експресії більш високого рівня людської 2,6-сіалілтрансферази (SIAT1). Цей фермент відповідає за приєднання сіалової кислоти в альфа-2,6 зв'язку до галактози на глікопротеїнах та гліколіпідах. Модифікація була проведена з метою підвищення експресії альфа-2,6-зв'язаних сіалових кислот, які є первинними рецепторами для вірусів грипу людини. Це покращення є критично важливим, оскільки робить клітини MDCK-SIAT1 більш схожими на епітелій дихальних шляхів людини, який природно має високу концентрацію цих рецепторів. Як наслідок, ці клітини є більш фізіологічно релевантною моделлю для вивчення вірусів грипу людини та їх взаємодії з потенційними противірусними сполуками.

Одне з важливих застосувань клітин MDCK-SIAT1 полягає в оцінці чутливості вірусу грипу до інгібіторів нейрамінідази (NAI), таких як озельтамівір. Завдяки підвищеній присутності альфа-2,6-зв'язаних сіалових кислот клітини MDCK-SIAT1 демонструють підвищену чутливість до NAI порівняно з немодифікованими MDCK-клітинами. Це робить їх чудовим інструментом для виявлення резистентності до цих інгібіторів, особливо у клінічних ізолятів вірусів грипу людини з низькою кількістю пасажів. Клітинна лінія MDCK-SIAT1 дозволяє проводити більш точні дослідження in vitro ефективності ліків та взаємодії з вірусними рецепторами, що дає цінну інформацію для розробки противірусної терапії та механізмів резистентності.

37°C, 5% _CO2, волога атмосфера.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

У Cytion ми відповідаємо за якість та життєздатність нашої продукції. Ми гарантуємо, що наші клітини будуть життєздатними на початку культивування протягом 60 днів після відвантаження з нашого заводу. Ми запевняємо, що всі матеріали відповідають специфікаціям, описаним у сертифікаті аналізу та/або паспорті продукту

Для отримання більш детальної інформації, будь ласка, зверніться до нашого <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Заяви про гарантію</a>