MDCK-SIAT1

A linha celular MDCK-SIAT1 é uma versão modificada das células Madin-Darby Canine Kidney (MDCK), projectada para expressar níveis mais elevados de 2,6-sialiltransferase humana (SIAT1). Esta enzima é responsável pela adição de ácido siálico numa ligação alfa-2,6 à galactose em glicoproteínas e glicolípidos. A modificação foi efectuada para aumentar a expressão de ácidos siálicos ligados a alfa-2,6, que são os principais receptores dos vírus da gripe humana. Este aumento é fundamental, uma vez que torna as células MDCK-SIAT1 mais semelhantes ao epitélio das vias respiratórias humanas, que possui naturalmente uma elevada concentração destes receptores. Como resultado, estas células oferecem um modelo fisiologicamente mais relevante para o estudo dos vírus da gripe humana e das suas interações com potenciais compostos antivirais.

Uma das aplicações significativas das células MDCK-SIAT1 é a avaliação da sensibilidade do vírus da gripe aos inibidores da neuraminidase (NAI), como o oseltamivir. Devido à maior presença de ácidos siálicos ligados a alfa-2,6, as células MDCK-SIAT1 demonstram uma maior sensibilidade aos NAIs em comparação com as células MDCK não modificadas. Isto torna-as uma excelente ferramenta para detetar a resistência a estes inibidores, especialmente em isolados clínicos de vírus da gripe humana com baixo número de passagens. A linha celular MDCK-SIAT1 permite estudos in vitro mais precisos da eficácia dos medicamentos e das interações com os receptores virais, fornecendo informações valiosas sobre o desenvolvimento de terapias antivirais e mecanismos de resistência.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia