MDCK-SIAT1

Buněčná linie MDCK-SIAT1 je modifikovaná verze buněk Madin-Darbyho psích ledvin (MDCK), která je upravena tak, aby exprimovala vyšší množství lidské 2,6-sialyltransferázy (SIAT1). Tento enzym je zodpovědný za přidávání kyseliny sialové ve vazbě alfa-2,6 na galaktózu na glykoproteinech a glykolipidech. Modifikace byla provedena za účelem zvýšení exprese sialových kyselin navázaných na alfa-2,6, které jsou primárními receptory pro lidské chřipkové viry. Toto zvýšení je zásadní, protože díky němu se buňky MDCK-SIAT1 více podobají epitelu lidských dýchacích cest, který má přirozeně vysokou koncentraci těchto receptorů. V důsledku toho tyto buňky nabízejí fyziologicky relevantnější model pro studium lidských chřipkových virů a jejich interakcí s potenciálními antivirovými sloučeninami.

Jednou z významných aplikací buněk MDCK-SIAT1 je hodnocení citlivosti chřipkového viru na inhibitory neuraminidázy (NAI), jako je oseltamivir. Díky zvýšené přítomnosti alfa-2,6-silialových kyselin vykazují buňky MDCK-SIAT1 lepší citlivost na NAI ve srovnání s nemodifikovanými buňkami MDCK. To z nich činí vynikající nástroj pro zjišťování rezistence k těmto inhibitorům, zejména u klinických izolátů lidských chřipkových virů s nízkým počtem průchodů. Buněčná linie MDCK-SIAT1 umožňuje přesnější in vitro studie účinnosti léčiv a interakcí s virovými receptory, což poskytuje cenné poznatky o vývoji antivirové terapie a mechanismech rezistence.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

Ve společnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopností našich produktů. Zaručujeme, že naše buňky budou životaschopné na začátku kultivace po dobu 60 dnů po odeslání z našich zařízení. Zaručujeme, že všechny materiály odpovídají specifikacím popsaným v certifikátu analýzy a/nebo v produktovém listu

Úplné informace naleznete v našem <a href=""/Kdo-jsme/Záruka/"" hreflang=""x-default"">Záručním prohlášení