MDCK-SIAT1

Celična linija MDCK-SIAT1 je spremenjena različica celic Madin-Darby Canine Kidney (MDCK), ki so bile oblikovane tako, da izražajo višje ravni človeške 2,6-sialiiltransferaze (SIAT1). Ta encim je odgovoren za dodajanje sialne kisline v povezavi alfa-2,6 na galaktozo na glikoproteine in glikolipide. Modifikacija je bila izvedena za povečanje izražanja sialnih kislin, vezanih na alfa-2,6, ki so glavni receptorji za viruse človeške gripe. To povečanje je ključnega pomena, saj so celice MDCK-SIAT1 zaradi tega bolj podobne epiteliju človeških dihalnih poti, ki ima naravno visoko koncentracijo teh receptorjev. Posledično te celice ponujajo fiziološko ustreznejši model za preučevanje virusov človeške gripe in njihovih interakcij s potencialnimi protivirusnimi spojinami.

Ena od pomembnih aplikacij celic MDCK-SIAT1 je ocenjevanje občutljivosti virusov gripe na zaviralce nevraminidaze (NAI), kot je oseltamivir. Zaradi povečane prisotnosti alfa-2,6 vezanih sialičnih kislin celice MDCK-SIAT1 izkazujejo večjo občutljivost na NAI v primerjavi z nemodificiranimi celicami MDCK. Zaradi tega so odlično orodje za odkrivanje odpornosti na te zaviralce, zlasti pri kliničnih izolatih človeških virusov gripe z nizkim številom prehodov. Celična linija MDCK-SIAT1 omogoča natančnejše in vitro študije učinkovitosti zdravil in interakcij z virusnimi receptorji, kar zagotavlja dragocen vpogled v razvoj protivirusnih terapij in mehanizmov odpornosti.

37 °C, 5 %_CO2, vlažno ozračje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka

Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo