MDCK-SIAT1

La lignée cellulaire MDCK-SIAT1 est une version modifiée des cellules rénales canines Madin-Darby (MDCK), conçue pour exprimer des niveaux plus élevés de 2,6-sialyltransférase humaine (SIAT1). Cette enzyme est responsable de l’ajout d’acide sialique par une liaison alpha-2,6 au galactose présent sur les glycoprotéines et les glycolipides. Cette modification a été effectuée afin d’augmenter l’expression des acides sialiques liés par une liaison alpha-2,6, qui constituent les principaux récepteurs des virus de la grippe humaine. Cette amélioration est essentielle, car elle rend les cellules MDCK-SIAT1 plus similaires à l’épithélium des voies respiratoires humaines, qui présente naturellement une forte concentration de ces récepteurs. Par conséquent, ces cellules constituent un modèle plus pertinent sur le plan physiologique pour l’étude des virus de la grippe humaine et de leurs interactions avec des composés antiviraux potentiels.

L’une des applications majeures des cellules MDCK-SIAT1 réside dans l’évaluation de la sensibilité du virus de la grippe aux inhibiteurs de la neuraminidase (INA), tels que l’oseltamivir. En raison de la présence accrue d’acides sialiques liés par une liaison alpha-2,6, les cellules MDCK-SIAT1 présentent une sensibilité accrue aux INA par rapport aux cellules MDCK non modifiées. Cela en fait un excellent outil pour détecter la résistance à ces inhibiteurs, en particulier dans les isolats cliniques de virus de la grippe humaine à faible nombre de passages. La lignée cellulaire MDCK-SIAT1 permet de mener des études in vitro plus précises sur l’efficacité des médicaments et les interactions avec les récepteurs viraux, fournissant ainsi des renseignements précieux pour le développement de traitements antiviraux et la compréhension des mécanismes de résistance.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.