MDCK-SIAT1

De MDCK-SIAT1 cellijn is een gemodificeerde versie van de Madin-Darby Canine Kidney (MDCK) cellen, ontworpen om hogere niveaus van humaan 2,6-sialyltransferase (SIAT1) tot expressie te brengen. Dit enzym is verantwoordelijk voor de toevoeging van siaalzuur in een alfa-2,6 koppeling aan galactose op glycoproteïnen en glycolipiden. De modificatie werd uitgevoerd om de expressie te verhogen van alfa-2,6-gekoppelde siaalzuren, die de primaire receptoren zijn voor humane influenzavirussen. Deze verbetering is cruciaal omdat het de MDCK-SIAT1 cellen meer doet lijken op het menselijke luchtwegepitheel, dat van nature een hoge concentratie van deze receptoren heeft. Hierdoor bieden deze cellen een fysiologisch relevanter model voor het bestuderen van humane influenzavirussen en hun interacties met potentiële antivirale verbindingen.

Een van de belangrijkste toepassingen van MDCK-SIAT1 cellen is de beoordeling van de gevoeligheid van influenzavirussen voor neuraminidaseremmers (NAI's), zoals oseltamivir. Door de verhoogde aanwezigheid van alfa-2,6-gekoppelde siaalzuren zijn MDCK-SIAT1 cellen gevoeliger voor NAI's dan ongemodificeerde MDCK cellen. Hierdoor zijn ze een uitstekend hulpmiddel voor het opsporen van resistentie tegen deze remmers, vooral in klinische isolaten van humane influenzavirussen met een laag aantal passages. De MDCK-SIAT1 cellijn maakt nauwkeuriger in vitro studies van de werkzaamheid van geneesmiddelen en virale receptorinteracties mogelijk, wat waardevolle inzichten oplevert in de ontwikkeling van antivirale therapieën en resistentiemechanismen.

37°C, 5%_CO2, bevochtigde atmosfeer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

Bij Cytion staan we achter de kwaliteit en levensvatbaarheid van onze producten. We garanderen dat onze cellen levensvatbaar zijn bij het begin van de kweek gedurende 60 dagen na verzending vanuit onze faciliteiten. We verzekeren dat alle materialen voldoen aan de specificaties beschreven in het analysecertificaat en/of productblad

Raadpleeg voor volledige informatie onze <a href=""/Wie-zijn-wij/Garantie/"" hreflang=""x-default"">Garantieverklaring