NRK-EGFP2-Nup50

NRK-EGFP2-Nup50 ląstelių linija yra stabili kloninė ląstelių linija, gauta iš normalių žiurkių inkstų (NRK) ląstelių. Ši ląstelių linija buvo sukurta transfekcijos būdu, naudojant žiedinę plazmidę, kurioje yra genas, koduojantis sustiprinto žaliojo fluorescencinio baltymo (EGFP) ir nukleoporino 50 (Nup50) sintezės baltymą, o po to atrenkant atsparumą vaistams. Dėl to maždaug 50 % ląstelių ekspresuoja EGFP3-Nup50 sintezės baltymą, kuris leidžia vizualizuoti ir sekti Nup50 ląstelės aplinkoje.

Nup50 yra labai svarbi branduolio porų komplekso sudedamoji dalis, atsakinga už molekulių pernešimą tarp branduolio ir citoplazmos. Naudojant EGFP3 žymę galima atlikti gyvų ląstelių vaizdavimą ir kitus fluorescencija pagrįstus metodus Nup50 lokalizacijai, dinamikai ir sąveikai tirti. Nepaisant to, kad NRK-EGFP2-Nup50 ląstelės yra stabili ląstelių linija, jos šiek tiek varijuoja, o tai rodo, kad EGFP3-Nup50 sintezės baltymo raiškos lygis ląstelėse yra nevienodas.

Ši ląstelių linija ypač vertinga atliekant tyrimus, susijusius su nukleocitoplazminiu pernešimu, branduolio porų komplekso dinamika ir funkciniu Nup50 vaidmeniu įvairiuose ląstelės procesuose. NRK-EGFP2-Nup50 ląstelės tinka įvairiems eksperimentiniams metodams, įskaitant fluorescencijos atkūrimą po fotobleachingo (FRAP), fluorescencijos koreliacinę spektroskopiją (FCS) ir kitus pažangius mikroskopijos metodus. Šie tyrimai gali padėti suprasti molekulinius branduolio pernašos mechanizmus ir padėti suprasti ligas, susijusias su branduolio pernašos disfunkcija, pavyzdžiui, tam tikras vėžines ligas ir neurodegeneracinius sutrikimus.

37 °C, 5 %_CO2, drėkintoje atmosferoje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

" Cytion" garantuoja savo produktų kokybę ir gyvybingumą. Garantuojame, kad mūsų ląstelės bus gyvybingos kultūrų auginimo pradžioje 60 dienų po išsiuntimo iš mūsų gamyklos. Užtikriname, kad visos medžiagos atitinka analizės sertifikate ir (arba) gaminio lape aprašytas specifikacijas

Išsamią informaciją rasite mūsų <a href=""/Kas mes esame/garantijos/" hreflang=""x-default"">Garantijos pareiškime