NRK-EGFP2-Nup50

Клетъчната линия NRK-EGFP2-Nup50 е стабилна клонова клетъчна линия, получена от нормални плъши бъбречни клетки (NRK). Тази клетъчна линия е създадена чрез трансфекция на кръгова плазмида, съдържаща ген, кодиращ фюжън протеин от подобрен зелен флуоресцентен протеин (EGFP) и нуклеопорин 50 (Nup50), последвана от селекция за лекарствена резистентност. В резултат на това приблизително 50 % от клетките експресират фюжън протеина EGFP3-Nup50, което позволява визуализирането и проследяването на Nup50 в клетъчната среда.

Nup50 е критичен компонент на комплекса на ядрената пора, който отговаря за регулирането на преноса на молекули между ядрото и цитоплазмата. Тагът EGFP3 позволява да се правят изображения на живи клетки и други флуоресцентни техники за изследване на локализацията, динамиката и взаимодействията на Nup50. Въпреки че е стабилна клетъчна линия, клетките NRK-EGFP2-Nup50 показват известна вариабилност, което показва променливост в нивата на експресия на фюжън протеина EGFP3-Nup50 в клетките.

Тази клетъчна линия е особено ценна за изследвания, насочени към нуклеоцитоплазмения транспорт, динамиката на ядрения порен комплекс и функционалната роля на Nup50 в различни клетъчни процеси. Клетките NRK-EGFP2-Nup50 са подходящи за редица експериментални подходи, включително възстановяване на флуоресценцията след фотооблекчаване (FRAP), флуоресцентна корелационна спектроскопия (FCS) и други усъвършенствани микроскопски техники. Тези изследвания могат да предоставят информация за молекулярните механизми на ядрения транспорт и да допринесат за разбирането на болести, свързани с дисфункция на ядрения транспорт, като някои видове рак и невродегенеративни заболявания.

37°C, 5%_CO2, овлажнена атмосфера.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

Ние в Cytion заставаме зад качеството и жизнеспособността на нашите продукти. Гарантираме, че нашите клетки ще бъдат жизнеспособни в началото на култивирането в продължение на 60 дни след изпращането им от нашите съоръжения. Гарантираме, че всички материали отговарят на спецификациите, описани в сертификата за анализ и/или продуктовата листа

За пълни подробности, моля, направете справка с нашата <a href=""/Кои сме ние/Гаранция/"" hreflang=""x-default"">Гаранционна декларация