NRK-EGFP2-Nup50

NRK-EGFP2-Nup50 hücre hattı, normal sıçan böbrek (NRK) hücrelerinden türetilen klonal stabil bir hücre hattıdır. Bu hücre hattı, Geliştirilmiş Yeşil Floresan Protein (EGFP) ve Nükleoporin 50 (Nup50) füzyon proteinini kodlayan geni içeren dairesel bir plazmidin transfeksiyonu ve ardından ilaç direnci seçimi yoluyla oluşturulmuştur. Sonuç olarak, hücrelerin yaklaşık %50'si EGFP3-Nup50 füzyon proteinini ifade eder ve bu da Nup50'nin hücresel ortamda görüntülenmesini ve izlenmesini sağlar.

Nup50, çekirdek ve sitoplazma arasında moleküllerin taşınmasını düzenlemekten sorumlu olan nükleer gözenek kompleksinin kritik bir bileşenidir. EGFP3 etiketi, Nup50'nin lokalizasyonunu, dinamiklerini ve etkileşimlerini incelemek için canlı hücre görüntüleme ve diğer floresan bazlı tekniklere izin verir. NRK-EGFP2-Nup50 hücreleri, kararlı bir hücre hattı olmasına rağmen, hücreler arasında EGFP3-Nup50 füzyon proteininin ekspresyon seviyelerindeki değişkenliği gösteren bir miktar alacalanma sergiler.

Bu hücre hattı, nükleositoplazmik taşıma, nükleer gözenek kompleksi dinamikleri ve Nup50'nin çeşitli hücresel süreçlerdeki işlevsel rolüne odaklanan araştırmalar için özellikle değerlidir. NRK-EGFP2-Nup50 hücreleri, fotobozulma sonrası floresan geri kazanımı (FRAP), floresan korelasyon spektroskopisi (FCS) ve diğer gelişmiş mikroskopi teknikleri dahil olmak üzere bir dizi deneysel yaklaşım için uygundur. Bu çalışmalar, nükleer taşımanın moleküler mekanizmaları hakkında bilgi sağlayabilir ve bazı kanserler ve nörodejeneratif bozukluklar gibi nükleer taşıma işlev bozukluğu ile ilişkili hastalıkların anlaşılmasına katkıda bulunabilir.

37°C, %5_CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

Cytion olarak ürünlerimizin kalitesinin ve canlılığının arkasındayız. Hücrelerimizin, tesislerimizden sevkiyattan sonra 60 gün boyunca kültürün başlangıcında canlı olacağını garanti ediyoruz. Tüm malzemelerin Analiz Sertifikası ve/veya Ürün Sayfasında açıklanan özelliklere uygun olduğunu garanti ediyoruz

Tüm ayrıntılar için lütfen <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garanti Beyanımıza bakın