NRK-EGFP2-Nup50

Die NRK-EGFP2-Nup50-Zelllinie ist eine klonale stabile Zelllinie, die aus normalen Rattennierenzellen (NRK) gewonnen wird. Diese Zelllinie wurde durch Transfektion eines zirkulären Plasmids erzeugt, das das Gen für das Fusionsprotein aus Enhanced Green Fluorescent Protein (EGFP) und Nucleoporin 50 (Nup50) enthält, gefolgt von einer Selektion auf Arzneimittelresistenz. Infolgedessen exprimieren etwa 50 % der Zellen das EGFP3-Nup50-Fusionsprotein, was die Visualisierung und Verfolgung von Nup50 in der zellulären Umgebung ermöglicht.

Nup50 ist ein wichtiger Bestandteil des Kernporenkomplexes, der den Transport von Molekülen zwischen dem Zellkern und dem Zytoplasma reguliert. Der EGFP3-Tag ermöglicht die Bildgebung in lebenden Zellen und andere fluoreszenzbasierte Techniken zur Untersuchung der Lokalisierung, Dynamik und Interaktionen von Nup50. Obwohl es sich um eine stabile Zelllinie handelt, weisen die NRK-EGFP2-Nup50-Zellen eine gewisse Variabilität auf, was auf eine unterschiedliche Expression des EGFP3-Nup50-Fusionsproteins in den Zellen hinweist.

Diese Zelllinie ist besonders wertvoll für die Erforschung des nukleozytoplasmatischen Transports, der Dynamik des Kernporenkomplexes und der funktionellen Rolle von Nup50 in verschiedenen zellulären Prozessen. Die NRK-EGFP2-Nup50-Zellen eignen sich für eine Reihe von experimentellen Ansätzen, darunter die Fluoreszenzerholung nach Photobleichung (FRAP), die Fluoreszenzkorrelationsspektroskopie (FCS) und andere fortschrittliche Mikroskopietechniken. Diese Studien können Einblicke in die molekularen Mechanismen des Kerntransports geben und zum Verständnis von Krankheiten beitragen, die mit einer Störung des Kerntransports einhergehen, wie z. B. bestimmte Krebserkrankungen und neurodegenerative Störungen.

37°C, 5%_CO2, befeuchtete Atmosphäre.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

Bei Cytion stehen wir hinter der Qualität und Lebensfähigkeit unserer Produkte. Wir garantieren, dass unsere Zellen zu Beginn der Kultur für 60 Tage nach dem Versand aus unseren Einrichtungen lebensfähig sind. Wir versichern, dass alle Materialien mit den im Analysezertifikat und/oder Produktblatt beschriebenen Spezifikationen übereinstimmen

Ausführliche Informationen finden Sie in unserer <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantieerklärung