NRK-EGFP2-Nup50

Buněčná linie NRK-EGFP2-Nup50 je klonální stabilní buněčná linie odvozená z buněk normální ledviny potkana (NRK). Tato buněčná linie byla vytvořena transfekcí kruhového plazmidu obsahujícího gen kódující fúzní protein zesíleného zeleného fluorescenčního proteinu (EGFP) a nukleoporinu 50 (Nup50), po níž následovala selekce na rezistenci k léčivům. Výsledkem je, že přibližně 50 % buněk exprimuje fúzní protein EGFP3-Nup50, což umožňuje vizualizaci a sledování Nup50 v buněčném prostředí.

Nup50 je kritickou součástí komplexu jaderných pórů, který je zodpovědný za regulaci transportu molekul mezi jádrem a cytoplazmou. Značka EGFP3 umožňuje zobrazování živých buněk a další fluorescenční techniky ke studiu lokalizace, dynamiky a interakcí Nup50. Přestože se jedná o stabilní buněčnou linii, buňky NRK-EGFP2-Nup50 vykazují určitou variabilitu, což svědčí o proměnlivosti úrovně exprese fúzního proteinu EGFP3-Nup50 mezi buňkami.

Tato buněčná linie je zvláště cenná pro výzkum zaměřený na nukleocytoplazmatický transport, dynamiku komplexu jaderných pórů a funkční úlohu Nup50 v různých buněčných procesech. Buňky NRK-EGFP2-Nup50 jsou vhodné pro řadu experimentálních přístupů, včetně obnovy fluorescence po fotobleachingu (FRAP), fluorescenční korelační spektroskopie (FCS) a dalších pokročilých mikroskopických technik. Tyto studie mohou poskytnout vhled do molekulárních mechanismů jaderného transportu a přispět k pochopení nemocí spojených s poruchou jaderného transportu, jako jsou některé druhy rakoviny a neurodegenerativní poruchy.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

Ve společnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopností našich produktů. Zaručujeme, že naše buňky budou životaschopné na začátku kultivace po dobu 60 dnů po odeslání z našich zařízení. Zaručujeme, že všechny materiály odpovídají specifikacím popsaným v certifikátu analýzy a/nebo v produktovém listu

Úplné informace naleznete v našem <a href=""/Kdo-jsme/Záruka/"" hreflang=""x-default"">Záručním prohlášení