NRK-EGFP2-Nup50

Cellinjen NRK-EGFP2-Nup50 är en klonal stabil cellinje som härrör från normala njurceller från råtta (NRK). Denna cellinje genererades genom transfektion av en cirkulär plasmid innehållande genen som kodar för fusionsproteinet av Enhanced Green Fluorescent Protein (EGFP) och Nucleoporin 50 (Nup50), följt av selektion för läkemedelsresistens. Som ett resultat av detta uttrycker cirka 50% av cellerna fusionsproteinet EGFP3-Nup50, vilket möjliggör visualisering och spårning av Nup50 i cellmiljön.

Nup50 är en kritisk komponent i kärnporkomplexet, som ansvarar för att reglera transporten av molekyler mellan kärnan och cytoplasman. EGFP3-taggen möjliggör avbildning av levande celler och andra fluorescensbaserade tekniker för att studera lokalisering, dynamik och interaktioner hos Nup50. Trots att det är en stabil cellinje uppvisar NRK-EGFP2-Nup50-cellerna en viss variation, vilket indikerar variabilitet i uttrycksnivåerna för fusionsproteinet EGFP3-Nup50 mellan cellerna.

Denna cellinje är särskilt värdefull för forskning som fokuserar på nukleocytoplasmisk transport, kärnporskomplexets dynamik och Nup50:s funktionella roll i olika cellprocesser. NRK-EGFP2-Nup50-cellerna är lämpliga för en rad olika experimentella metoder, inklusive fluorescensåterhämtning efter fotoblekning (FRAP), fluorescenskorrelationsspektroskopi (FCS) och andra avancerade mikroskopitekniker. Dessa studier kan ge insikter i de molekylära mekanismerna för kärntransport och bidra till förståelsen av sjukdomar som är förknippade med dysfunktion i kärntransporten, såsom vissa cancerformer och neurodegenerativa sjukdomar.

37°C, 5%_CO2, befuktad atmosfär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

På Cytion står vi bakom våra produkters kvalitet och livskraft. Vi garanterar att våra celler är livsdugliga vid odlingens början i 60 dagar efter leverans från våra anläggningar. Vi försäkrar att allt material överensstämmer med de specifikationer som beskrivs i analyscertifikatet och/eller produktbladet

För fullständig information, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantiförklaring