NRK-EGFP2-Nup50

إن خط الخلايا NRK-EGFPP2-Nup50 هو خط خلوي مستقر نسلي مشتق من خلايا كلية الفئران الطبيعية (NRK). تم توليد هذا الخط الخلوي من خلال نقل بلازميد دائري يحتوي على الجين المشفر لبروتين الاندماج للبروتين المتوهج الأخضر المحسن (EGFP) وبروتين نيوكليوبورين 50 (Nup50)، يليه اختيار مقاومة الأدوية. ونتيجة لذلك، يعبر ما يقرب من 50% من الخلايا عن البروتين المدمج EGFP3-Nup50، مما يتيح تصور وتتبع Nup50 داخل البيئة الخلوية.

يُعد Nup50 مكونًا مهمًا في مركب المسام النووي، وهو المسؤول عن تنظيم نقل الجزيئات بين النواة والسيتوبلازم. تسمح علامة EGFP3 بتصوير الخلايا الحية وغيرها من التقنيات القائمة على التألق لدراسة توطين وديناميكيات وتفاعلات Nup50. على الرغم من كونه خط خلوي مستقر، تُظهر خلايا NRK-EGFPP2-Nup50 بعض التباين، مما يشير إلى التباين في مستويات التعبير عن بروتين الاندماج EGFP3-Nup50 بين الخلايا.

ويُعد هذا الخط الخلوي ذا قيمة خاصة للأبحاث التي تركز على النقل النووي وديناميكيات مجمع المسام النووية والدور الوظيفي لبروتين Nup50 في العمليات الخلوية المختلفة. تُعد خلايا NRK-EGFPP2-Nup50 مناسبة لمجموعة من الأساليب التجريبية، بما في ذلك استعادة التألق بعد التبييض الضوئي (FRAP)، والتحليل الطيفي لارتباط التألق (FCS)، وغيرها من تقنيات الفحص المجهري المتقدمة. يمكن أن توفر هذه الدراسات رؤى حول الآليات الجزيئية للنقل النووي وتساهم في فهم الأمراض المرتبطة بخلل في النقل النووي، مثل بعض أنواع السرطان والاضطرابات العصبية التنكسية.

37 درجة مئوية، و5% من _ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

في Cytion، نلتزم في Cytion بجودة منتجاتنا وحيويتها. نحن نضمن أن تكون خلايانا قابلة للحياة في بداية الاستزراع لمدة 60 يومًا بعد الشحن من منشآتنا. نؤكد أن جميع المواد مطابقة للمواصفات الموضحة في شهادة التحليل و/أو ورقة المنتج

للحصول على التفاصيل الكاملة، يُرجى الرجوع إلى <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">بيان الضمان