NRK-EGFP2-Nup50

Dòng tế bào NRK-EGFP2-Nup50 là một dòng tế bào ổn định được phân lập từ tế bào thận chuột bình thường (NRK). Dòng tế bào này được tạo ra thông qua quá trình chuyển gen bằng plasmid tròn chứa gen mã hóa protein liên hợp giữa Protein Phát Quang Xanh Tăng Cường (EGFP) và Nucleoporin 50 (Nup50), sau đó được chọn lọc bằng kháng sinh. Kết quả, khoảng 50% tế bào biểu hiện protein liên hợp EGFP3-Nup50, cho phép quan sát và theo dõi Nup50 trong môi trường tế bào.

Nup50 là thành phần quan trọng của phức hợp lỗ nhân, chịu trách nhiệm điều tiết vận chuyển phân tử giữa nhân và chất tế bào. Thẻ EGFP3 cho phép quan sát tế bào sống và các kỹ thuật dựa trên huỳnh quang để nghiên cứu vị trí, động học và tương tác của Nup50. Mặc dù là dòng tế bào ổn định, các tế bào NRK-EGFP2-Nup50 vẫn có sự biến đổi, cho thấy sự khác biệt về mức độ biểu hiện của protein liên hợp EGFP3-Nup50 giữa các tế bào.

Dòng tế bào này đặc biệt hữu ích cho các nghiên cứu tập trung vào vận chuyển nhân-chất tế bào, động học của phức hợp lỗ nhân và vai trò chức năng của Nup50 trong các quá trình tế bào khác nhau. Các tế bào NRK-EGFP2-Nup50 phù hợp cho nhiều phương pháp thí nghiệm, bao gồm phục hồi huỳnh quang sau khi làm mờ bằng ánh sáng (FRAP), quang phổ tương quan huỳnh quang (FCS) và các kỹ thuật viễn vọng hiện đại khác. Các nghiên cứu này có thể cung cấp thông tin về cơ chế phân tử của vận chuyển nhân và góp phần vào việc hiểu rõ các bệnh liên quan đến rối loạn vận chuyển nhân, như một số loại ung thư và rối loạn thoái hóa thần kinh.

37°C, 5%_CO₂, môi trường ẩm.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

Tại Cytion, chúng tôi cam kết về chất lượng và khả năng sống của các sản phẩm của mình. Chúng tôi đảm bảo rằng các tế bào của chúng tôi sẽ có khả năng sống tại thời điểm bắt đầu nuôi cấy trong 60 ngày kể từ khi vận chuyển từ cơ sở của chúng tôi. Chúng tôi cam kết rằng tất cả các vật liệu tuân thủ các thông số kỹ thuật được mô tả trong Giấy chứng nhận phân tích và/hoặc Tài liệu sản phẩm.

Để biết chi tiết đầy đủ, vui lòng tham khảo <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Tuyên bố Bảo hành.