NRK-EGFP2-Nup50

Celična linija NRK-EGFP2-Nup50 je stabilna klonska celična linija, pridobljena iz celic normalnih ledvic podgan (NRK). Ta celična linija je bila ustvarjena s transfekcijo krožnega plazmida, ki vsebuje gen, ki kodira fuzijski protein izboljšanega zelenega fluorescenčnega proteina (EGFP) in nukleoporina 50 (Nup50), čemur je sledila selekcija odpornosti na zdravila. Tako približno 50 % celic izraža fuzijski protein EGFP3-Nup50, kar omogoča vizualizacijo in sledenje Nup50 v celičnem okolju.

Nup50 je ključna sestavina kompleksa jedrskih por, ki je odgovoren za uravnavanje prenosa molekul med jedrom in citoplazmo. Oznaka EGFP3 omogoča slikanje živih celic in druge tehnike, ki temeljijo na fluorescenci, za preučevanje lokalizacije, dinamike in interakcij Nup50. Kljub temu da gre za stabilno celično linijo, celice NRK-EGFP2-Nup50 kažejo določeno variabilnost, kar kaže na različno raven izražanja fuzijskega proteina EGFP3-Nup50 med celicami.

Ta celična linija je še posebej dragocena za raziskave, usmerjene v nukleocitoplazemski transport, dinamiko kompleksa jedrskih por in funkcionalno vlogo Nup50 v različnih celičnih procesih. Celice NRK-EGFP2-Nup50 so primerne za vrsto eksperimentalnih pristopov, vključno z obnovitvijo fluorescence po fotobeljenju (FRAP), fluorescenčno korelacijsko spektroskopijo (FCS) in drugimi naprednimi mikroskopskimi tehnikami. Te študije lahko omogočijo vpogled v molekularne mehanizme jedrskega transporta in prispevajo k razumevanju bolezni, povezanih z motnjami v delovanju jedrskega transporta, kot so nekateri raki in nevrodegenerativne motnje.

37 °C, 5 %_CO2, vlažno ozračje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka

Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo