NRK-EGFP2-Nup50

NRK-EGFP2-Nup50 šūnu līnija ir klonāla stabila šūnu līnija, kas iegūta no normālām žurku nieru (NRK) šūnām. Šī šūnu līnija tika izveidota, transfekējot apļveida plazmīdu, kas satur gēnu, kurš kodē pastiprināta zaļā fluorescējošā proteīna (EGFP) un nukleoporīna 50 (Nup50) saplūšanas proteīnu, un pēc tam veicot zāļu rezistences selekciju. Rezultātā aptuveni 50 % šūnu ekspresē EGFP3-Nup50 saplūšanas proteīnu, kas ļauj vizualizēt un izsekot Nup50 šūnu vidē.

Nup50 ir kodola poru kompleksa būtiska sastāvdaļa, kas regulē molekulu transportu starp kodolu un citoplazmu. EGFP3 marķējums ļauj veikt dzīvās šūnas attēlveidošanu un citas uz fluorescenci balstītas metodes, lai pētītu Nup50 lokalizāciju, dinamiku un mijiedarbību. Lai gan NRK-EGFP2-Nup50 šūnu līnija ir stabila, NRK-EGFP2-Nup50 šūnām ir zināmas variācijas, kas norāda uz EGFP3-Nup50 saplūšanas proteīna ekspresijas līmeņu mainību šūnās.

Šī šūnu līnija ir īpaši vērtīga pētījumiem, kas vērsti uz nukleocitoplazmas transportu, kodola poru kompleksa dinamiku un Nup50 funkcionālo lomu dažādos šūnu procesos. NRK-EGFP2-Nup50 šūnas ir piemērotas dažādām eksperimentālām metodēm, tostarp fluorescences atgūšanai pēc fotobloķēšanas (FRAP), fluorescences korelācijas spektroskopijai (FCS) un citām modernām mikroskopijas metodēm. Šie pētījumi var sniegt ieskatu kodola transporta molekulārajos mehānismos un veicināt izpratni par slimībām, kas saistītas ar kodola transporta disfunkciju, piemēram, dažiem vēža veidiem un neirodeģeneratīviem traucējumiem.

37°C, 5%_CO2, mitrināta atmosfēra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām

Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu