NRK-EGFP2-Nup50

Η κυτταρική σειρά NRK-EGFP2-Nup50 είναι μια κλωνική σταθερή κυτταρική σειρά που προέρχεται από κύτταρα φυσιολογικών νεφρών αρουραίου (NRK). Αυτή η κυτταρική σειρά δημιουργήθηκε μέσω της διαμόλυνσης ενός κυκλικού πλασμιδίου που περιέχει το γονίδιο που κωδικοποιεί την πρωτεΐνη σύντηξης της ενισχυμένης πράσινης φθορίζουσας πρωτεΐνης (EGFP) και της νουκλεοπορίνης 50 (Nup50), ακολουθούμενη από επιλογή ανθεκτικότητας στα φάρμακα. Ως αποτέλεσμα, περίπου το 50% των κυττάρων εκφράζουν την πρωτεΐνη σύντηξης EGFP3-Nup50, η οποία επιτρέπει την οπτικοποίηση και την παρακολούθηση της Nup50 εντός του κυτταρικού περιβάλλοντος.

Η Nup50 είναι ένα κρίσιμο συστατικό του συμπλόκου του πυρηνικού πόρου, το οποίο είναι υπεύθυνο για τη ρύθμιση της μεταφοράς μορίων μεταξύ του πυρήνα και του κυτταροπλάσματος. Η ετικέτα EGFP3 επιτρέπει την απεικόνιση σε ζωντανό κύτταρο και άλλες τεχνικές που βασίζονται στον φθορισμό για τη μελέτη του εντοπισμού, της δυναμικής και των αλληλεπιδράσεων του Nup50. Παρά το γεγονός ότι πρόκειται για μια σταθερή κυτταρική σειρά, τα κύτταρα NRK-EGFP2-Nup50 παρουσιάζουν κάποια ποικιλομορφία, υποδεικνύοντας μεταβλητότητα στα επίπεδα έκφρασης της πρωτεΐνης σύντηξης EGFP3-Nup50 μεταξύ των κυττάρων.

Αυτή η κυτταρική σειρά είναι ιδιαίτερα πολύτιμη για την έρευνα που επικεντρώνεται στην πυρηνοκυτταροπλασματική μεταφορά, τη δυναμική του συμπλόκου των πυρηνικών πόρων και τον λειτουργικό ρόλο της Nup50 σε διάφορες κυτταρικές διεργασίες. Τα κύτταρα NRK-EGFP2-Nup50 είναι κατάλληλα για μια σειρά πειραματικών προσεγγίσεων, συμπεριλαμβανομένης της ανάκτησης φθορισμού μετά από φωτοβλάστηση (FRAP), της φασματοσκοπίας συσχέτισης φθορισμού (FCS) και άλλων προηγμένων τεχνικών μικροσκοπίας. Οι μελέτες αυτές μπορούν να παράσχουν πληροφορίες για τους μοριακούς μηχανισμούς της πυρηνικής μεταφοράς και να συμβάλουν στην κατανόηση ασθενειών που σχετίζονται με δυσλειτουργία της πυρηνικής μεταφοράς, όπως ορισμένοι καρκίνοι και νευροεκφυλιστικές διαταραχές.

37°C, 5%_CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

Στην Cytion, υποστηρίζουμε την ποιότητα και τη βιωσιμότητα των προϊόντων μας. Εγγυόμαστε ότι τα κύτταρά μας θα είναι βιώσιμα κατά την έναρξη της καλλιέργειας για 60 ημέρες μετά την αποστολή από τις εγκαταστάσεις μας. Διαβεβαιώνουμε ότι όλα τα υλικά συμμορφώνονται με τις προδιαγραφές που περιγράφονται στο Πιστοποιητικό Ανάλυσης ή/και στο Φύλλο Προϊόντος

Για πλήρεις λεπτομέρειες, ανατρέξτε στην <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Δήλωση εγγύησης