NRK-EGFP2-Nup50

קו התאים NRK-EGFP2-Nup50 הוא קו תאים יציב וקלונלי שמקורו בתאי כליה נורמליים של חולדה (NRK). קו תאים זה נוצר באמצעות טרנספקציה של פלסמיד מעגלי המכיל את הגן המקודד לחלבון הממוזג של חלבון פלואורסצנטי ירוק משופר (EGFP) ו-Nucleoporin 50 (Nup50), ולאחר מכן באמצעות בחירת עמידות לתרופות. כתוצאה מכך, כ-50% מהתאים מבטאים את חלבון הפיוז'ן EGFP3-Nup50, המאפשר הדמיה ומעקב אחר Nup50 בסביבה התאית.

Nup50 הוא מרכיב קריטי במתחם הנקבוביות הגרעיניות, האחראי על ויסות העברת המולקולות בין הגרעין לציטופלסמה. התג EGFP3 מאפשר הדמיה של תאים חיים וטכניקות אחרות המבוססות על פלואורסצנציה כדי לחקור את המיקום, הדינמיקה והאינטראקציות של Nup50. למרות היותם קו תאים יציב, תאי NRK-EGFP2-Nup50 מציגים שונות מסוימת, המעידה על שונות ברמות הביטוי של חלבון ה-EGFP3-Nup50 בין התאים.

קו תאים זה הוא בעל ערך רב במיוחד למחקר המתמקד בהעברה גרעינית-ציטופלזמית, בדינמיקה של קומפלקס הנקבוביות הגרעיניות ובתפקיד התפקודי של Nup50 בתהליכים תאיים שונים. תאי NRK-EGFP2-Nup50 מתאימים למגוון גישות ניסוייות, כולל התאוששות פלואורסצנטית לאחר הלבנה פוטו-כימית (FRAP), ספקטרוסקופיית קורלציה פלואורסצנטית (FCS) וטכניקות מיקרוסקופיה מתקדמות אחרות. מחקרים אלה יכולים לספק תובנות על המנגנונים המולקולריים של הובלה גרעינית ולתרום להבנת מחלות הקשורות לתפקוד לקוי של הובלה גרעינית, כגון סוגי סרטן מסוימים והפרעות נוירודגנרטיביות.

37°C, 5%_CO2, אווירה לחה.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.

לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו