NRK-EGFP2-Nup50

Клітинна лінія NRK-EGFP2-Nup50 - це клональна стабільна клітинна лінія, отримана з клітин нормальної нирки щура (NRK). Ця клітинна лінія була отримана шляхом трансфекції кільцевої плазміди, що містить ген, який кодує білок злиття розширеного зеленого флуоресцентного білка (EGFP) і нуклеопорину 50 (Nup50), з подальшою селекцією на резистентність до лікарських препаратів. В результаті приблизно 50% клітин експресують злитий білок EGFP3-Nup50, що дозволяє візуалізувати і відстежувати Nup50 в клітинному середовищі.

Nup50 є критично важливим компонентом комплексу ядерних пор, який відповідає за регуляцію транспорту молекул між ядром і цитоплазмою. Мітка EGFP3 дозволяє за допомогою візуалізації живих клітин та інших флуоресцентних методів вивчати локалізацію, динаміку та взаємодію Nup50. Незважаючи на те, що клітини NRK-EGFP2-Nup50 є стабільною клітинною лінією, вони демонструють деяку варіабельність, що вказує на варіабельність рівнів експресії злитого білка EGFP3-Nup50 між клітинами.

Ця клітинна лінія є особливо цінною для досліджень, спрямованих на вивчення нуклеоцитоплазматичного транспорту, динаміки ядерно-порового комплексу та функціональної ролі Nup50 у різних клітинних процесах. Клітини NRK-EGFP2-Nup50 підходять для низки експериментальних підходів, включаючи відновлення флуоресценції після фотовідбілювання (FRAP), флуоресцентну кореляційну спектроскопію (FCS) та інші передові методи мікроскопії. Ці дослідження можуть дати уявлення про молекулярні механізми ядерного транспорту і сприяти розумінню захворювань, пов'язаних з дисфункцією ядерного транспорту, таких як деякі види раку і нейродегенеративні розлади.

37°C, 5% _CO2, волога атмосфера.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

У Cytion ми відповідаємо за якість та життєздатність нашої продукції. Ми гарантуємо, що наші клітини будуть життєздатними на початку культивування протягом 60 днів після відвантаження з нашого заводу. Ми запевняємо, що всі матеріали відповідають специфікаціям, описаним у сертифікаті аналізу та/або паспорті продукту

Для отримання більш детальної інформації, будь ласка, зверніться до нашого <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Заяви про гарантію</a>