Pereiti prie turinio
Audinys
Vaisiaus inkstas
Liga
Normalus vaisiaus inkstas (retrovirusų pakavimo ląstelių linija; netumorogeninė)
Metastazių vieta
Netaikoma (nekancinogeninė pakavimo ląstelių linija)
Sinonimai
ProPakA.6, PPA.6, PP-A.6

Dokumentai

ProPak-A.6

Cell line · Prekės numeris 305599

€0.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Pritaikymas / Rekomendacijos

Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

„ProPak-A.6“ (PPA.6) – tai iš žmogaus vaisiaus inkstų išskirta pakavimo ląstelių linija, sukurta replikacijos nesugebančių retrovirusinių vektorių gamybai. „ProPak-A.6“ stabiliai ekspresuoja adenoviruso-5 E1A sekas (transkripcijos transaktyvacijai) kartu su gag-, pol- ir env-baltymais, gautais iš pelių leukemijos viruso (MLV), o tai leidžia efektyviai pakuoti rekombinantinius retrovirusinius genomus į neinfekcines MLV pagrindu sukurtas virusines daleles. GMO-S1 klasifikacija atspindi šių virusinių transgenų stabilią integraciją.

„ProPak-A.6“ tinka naudoti kaip pakavimo ląstelių liniją, skirtą didelio titro rekombinantinių MLV pagrindu sukurtų retrovirusinių vektorių gamybai, skirtų genų perkėlimui į tikslines ląsteles. Ji naudojama genų terapijos vektorių gamyboje, besidalijančių ląstelių populiacijų stabilioje transdukcijoje ir tyrimuose, kuriuose reikalingas veiksmingas transgenų pristatymas retrovirusiniu būdu. Adenoviruso E1A komponentas sustiprina promotoriaus reguliuojamą ekspresiją, taip pagerindamas virusų gamybos efektyvumą. Vartotojai turėtų laikytis galiojančių biologinio saugumo taisyklių, taikomų dirbant su BSL-2 lygio retrovirusiniais vektoriais.

Audinys
Vaisiaus inkstas
Liga
Normalus vaisiaus inkstas (retrovirusų pakavimo ląstelių linija; netumorogeninė)
Metastazių vieta
Netaikoma (nekancinogeninė pakavimo ląstelių linija)
Paraiškos
Retrovirusinių vektorių gamyba; genų terapijos vektorių gamyba; stabilus besidalijančių ląstelių transdukcija; MLV pagrįstas retrovirusinis genų perdavimas; adenoviruso pagalba atliekamas retrovirusinių vektorių pakavimas; genų perdavimo tyrimai
Sinonimai
  • ProPakA.6
  • PPA.6
  • PP-A.6

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Moteris
Augimo savybės
Prisijungęs
GMO statusas
GMO-S1
Išsami informacija apie GMO statusą
GMO-S1: This human kidney-derived cell line (ProPaka.6) contains plasmid constructs encoding adenovirus-5 sequences together with gag-, pol-, and env-related proteins that form non-infectious murine leukemia virus particles. The inserts are stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biologinio saugumo lygis
2

03Charakteristikos

Morfologija
Į epitelį panašus
Ląstelių tipas
Epitelio ląstelės
Laikas, per kurį skaičius padvigubėja
maždaug nuo 24 iki 36 valandų

04Identifikatoriai

Nuoroda
ProPak-A.6 (Cytion katalogo numeris 305599)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_8968

05Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
DMEM, š: 4,5 g/l gliukozės, š: 4 mM L-glutamino, š: 3,7 g/l NaHCO3, š: 1,0 mM natrio piruvato (Cytion gaminio numeris 820300a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite terpę, nuplaukite PBS tirpalu be kalcio ir magnio, užpilkite „Accutase“, inkubuokite 8–10 min. kambario temperatūroje, vėl suspenduokite terpėje, centrifuguokite 300×g 3 min., išpilkite supernatantą, persėkite į šviežią terpę.
Skaidymo santykis
1–5
Sėjos tankis
2–4 × 10⁴/cm²
Skysčių atnaujinimas
Kas 1–2 dienas
Atšildymas ir auginimas

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

06Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

07Donoras

Donoro amžius
Vaisius