- Tissue
- ไตของทารกในครรภ์
- Disease
- ไตของทารกในครรภ์ที่ปกติ (สายเซลล์บรรจุเรโทรไวรัส; ไม่ก่อให้เกิดมะเร็ง)
- Metastatic site
- ไม่เกี่ยวข้อง (สายเซลล์บรรจุภัณฑ์ที่ไม่ก่อให้เกิดเนื้องอก)
- Synonyms
- ProPakA.6, PPA.6, PP-A.6
Documents
ProPak-A.6
Cell line · Product number 305599
Customization / Recommendations
- ProPak-A.6Cell line€0.00
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
ProPak-A.6 (PPA.6) เป็นสายเซลล์บรรจุที่สกัดจากไตของทารกมนุษย์ ซึ่งถูกพัฒนาขึ้นเพื่อผลิตเวกเตอร์เรโทรไวรัสที่ไม่สามารถจำลองตัวเองได้ ProPak-A.6 แสดงออกอย่างเสถียรของลำดับ E1A ของไวรัสอะดีโนไวรัส-5 (เพื่อการกระตุ้นการถอดรหัส) ร่วมกับโปรตีนที่เกี่ยวข้องกับ gag, pol และ env ที่มาจากไวรัสมะเร็งเม็ดเลือดขาวของหนู (MLV) ซึ่งช่วยให้สามารถบรรจุจีโนมเรโทรไวรัสที่สร้างขึ้นใหม่ได้อย่างมีประสิทธิภาพลงในอนุภาคไวรัสที่ไม่ก่อให้เกิดการติดเชื้อซึ่งมีพื้นฐานจาก MLV การจัดประเภท GMO-S1 สะท้อนถึงการบูรณาการอย่างคงที่ของทรานสเจนไวรัสเหล่านี้
ProPak-A.6 สามารถใช้เป็นสายเซลล์บรรจุเพื่อผลิตเวกเตอร์เรโทรไวรัสแบบรีคอมบิแนนท์ที่มีไทเตอร์สูงบนพื้นฐานของ MLV สำหรับการถ่ายโอนยีนเข้าสู่เซลล์เป้าหมาย มันถูกใช้ในกระบวนการผลิตเวกเตอร์สำหรับการบำบัดด้วยยีน การถ่ายโอนยีนอย่างคงที่ในประชากรเซลล์ที่กำลังแบ่งตัว และการศึกษาที่ต้องการการส่งยีนดัดแปลงด้วยเรโทรไวรัสอย่างมีประสิทธิภาพ ส่วนประกอบ E1A ของไวรัสอะดีโนช่วยเพิ่มการแสดงออกที่ถูกควบคุมโดยโปรโมเตอร์ ซึ่งช่วยปรับปรุงประสิทธิภาพการผลิตไวรัส ผู้ใช้ควรปฏิบัติตามกฎระเบียบด้านความปลอดภัยทางชีวภาพที่เกี่ยวข้องสำหรับการทำงานกับเวกเตอร์เรโทรไวรัสระดับ BSL-2
- Tissue
- ไตของทารกในครรภ์
- Disease
- ไตของทารกในครรภ์ที่ปกติ (สายเซลล์บรรจุเรโทรไวรัส; ไม่ก่อให้เกิดมะเร็ง)
- Metastatic site
- ไม่เกี่ยวข้อง (สายเซลล์บรรจุภัณฑ์ที่ไม่ก่อให้เกิดเนื้องอก)
- Applications
- การผลิตเวกเตอร์เรโทรไวรัส; การผลิตเวกเตอร์สำหรับการรักษาด้วยยีน; การถ่ายโอนยีนอย่างเสถียรในเซลล์ที่กำลังแบ่งตัว; การส่งยีนด้วยเรโทรไวรัสบนพื้นฐานของ MLV; การบรรจุเรโทรไวรัสด้วยความช่วยเหลือของอะดีโนไวรัส; การวิจัยด้านการถ่ายโอนยีน
- Synonyms
- ProPakA.6
- PPA.6
- PP-A.6
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- GMO status
- GMO-S1
- GMO status details
- GMO-S1: This human kidney-derived cell line (ProPaka.6) contains plasmid constructs encoding adenovirus-5 sequences together with gag-, pol-, and env-related proteins that form non-infectious murine leukemia virus particles. The inserts are stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biosafety level
- 2
03Characteristics
- Morphology
- ลักษณะคล้ายเยื่อบุผิว
- Cell type
- เซลล์เยื่อบุผิว
- Doubling time
- ประมาณ 24 ถึง 36 ชั่วโมง
04Identifiers
- Citation
- ProPak-A.6 (หมายเลขในแคตตาล็อก Cytion 305599)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_8968
05Handling and culture
- Culture medium
- DMEM, w: 4.5 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 4 มิลลิโมลาร์ แอล-กลูตามีน, w: 3.7 กรัม/ลิตร NaHCO3, w: 1.0 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต (หมายเลขบทความ Cytion 820300a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น
- Supplements
- เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
- Dissociation reagent
- แอคคูเทส
- Subculturing
- นำอาหารเลี้ยงเซลล์ออก ล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม ปิดด้วย Accutase ทำการอบที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8–10 นาที ละลายในอาหารเลี้ยงเซลล์ ปั่นเหวี่ยงที่ 300×g เป็นเวลา 3 นาที เทน้ำใสออก ใส่เซลล์กลับลงในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่
- Split ratio
- 1 ถึง 5
- Seeding density
- 2–4 × 10⁴/cm²
- Fluid renewal
- ทุก 1 ถึง 2 วัน
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.
Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery
06Quality control and cryopreservation
- Freeze medium
- ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ
- Storage conditions
สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น
- Shipping conditions
เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า
07Donor
- Donor age
- ทารกในครรภ์
08Legal and safety
- Safety precautions
- เมื่อวางแผนที่จะเก็บขวดแช่แข็งในไนโตรเจนเหลวเพื่อการละลายในอนาคต จำเป็นต้องปฏิบัติตามมาตรการความปลอดภัยอย่างเคร่งครัด การสวมถุงมือป้องกันและเสื้อผ้าที่เหมาะสมเป็นสิ่งจำเป็น และต้องใช้หน้ากากหรือแว่นตานิรภัยในระหว่างการถ่ายโอนตัวอย่างแช่แข็งไปยังหรือจากถังไนโตรเจนเหลว ทั้งนี้เพื่อลดความเสี่ยงจากการบาดเจ็บที่อาจเกิดจากการระเบิดของขวดแช่แข็งเมื่อนำออก ซึ่งอาจทำให้เศษแหลมคมกระเด็นออกมาได้
- Warranty
ที่Cytion เรามุ่งมั่นในคุณภาพและความมีชีวิตของผลิตภัณฑ์ของเรา เรารับประกันว่าเซลล์ของเราจะยังมีชีวิตอยู่เมื่อเริ่มการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 60 วันหลังจากจัดส่งจากโรงงานของเรา เรารับรองว่าวัสดุทั้งหมดเป็นไปตามข้อกำหนดที่ระบุไว้ใน ใบรับรองการวิเคราะห์ และ/หรือแผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์
สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม กรุณาดูที่ <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">นโยบายการรับประกัน.
- Material Transfer Agreement required
- Yes