Mine otse sisu juurde
Kude
Loote neer
Haigus
Normaalne loote neer (retroviiruse pakkimisrakuliin; mittetumorigeenne)
Metastaaside asukoht
Ei kohaldata (mittetumorigeenne pakkimisrakuliin)
Sünonüümid
ProPakA.6, PPA.6, PP-A.6

Dokumendid

ProPak-A.6

Cell line · Toote number 305599

€0.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta

Kohandamine / Soovitused

Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

ProPak-A.6 (PPA.6) on inimese loote neerust saadud pakkimisrakuliin, mis on loodud replikatsioonivõimetute retroviirusvektorite tootmiseks. ProPak-A.6 ekspresseerib stabiilselt adenoviiruse 5 E1A järjestusi (transkriptsioonilise transaktiveerimise jaoks) koos hiire leukeemiaviirusest (MLV) pärinevate gag-, pol- ja env-ga seotud valkudega, võimaldades rekombinantseid retroviirusgenoome tõhusalt pakendada mitteinfektsioonilistesse MLV-põhistesse viirusosakestesse. GMO-S1 klassifikatsioon peegeldab nende viiruslike transgeenide stabiilset integratsiooni.

ProPak-A.6 sobib pakkimisrakuliinina kõrge tiitriga rekombinantse MLV-põhiste retroviirusvektorite tootmiseks geenide siirdamiseks sihtrakkudesse. Seda kasutatakse geeniteraapia vektorite tootmisel, jagunevate rakupopulatsioonide stabiilsel transduktsioonil ning uuringutes, mis nõuavad transgeenide tõhusat retroviiruslikku edastamist. Adenoviiruse E1A komponent tugevdab promootorist juhitud ekspressiooni, parandades viiruse tootmise efektiivsust. Kasutajad peavad järgima BSL-2 retroviirusvektoritega töötamisel kehtivaid bioloogilise ohutuse eeskirju.

Kude
Loote neer
Haigus
Normaalne loote neer (retroviiruse pakkimisrakuliin; mittetumorigeenne)
Metastaaside asukoht
Ei kohaldata (mittetumorigeenne pakkimisrakuliin)
Rakendused
Retroviirusvektorite tootmine; geeniteraapia vektorite valmistamine; jagunevate rakkude stabiilne transduktsioon; MLV-põhine retroviiruslik geenide edastamine; adenoviiruse abil toimuv retroviiruslik pakkimine; geenide ülekande alased uuringud
Sünonüümid
  • ProPakA.6
  • PPA.6
  • PP-A.6

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
GMO-staatus
GMO-S1
GMO-staatuse üksikasjad
GMO-S1: This human kidney-derived cell line (ProPaka.6) contains plasmid constructs encoding adenovirus-5 sequences together with gag-, pol-, and env-related proteins that form non-infectious murine leukemia virus particles. The inserts are stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloogilise ohutuse tase
2

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed
Rakutüüp
Epiteelirakud
Kahekordistumisaeg
umbes 24–36 tundi

04Tunnused

Viide
ProPak-A.6 (Cytioni katalooginumber 305599)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_8968

05Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 4 mM L-glutamiini, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati (Cytioni artikli number 820300a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kasvukeskkond, peske PBS-ga, milles ei ole kaltsiumi ega magneesiumi, katke Accutase’iga, inkubeerige 8–10 minutit toatemperatuuril, suspendeerige uuesti kasvukeskkonnas, tsentrifuugige 300×g 3 minutit, valage supernatant ära, külvake uuesti värskesse kasvukeskkonda.
Jagamissuhe
1–5
Külvitihedus
2–4 × 10⁴/cm²
Vedeliku vahetus
Iga 1–2 päeva tagant
Sulatamine ja kasvatamine

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikuna kasutame täielikku kasvukeskkonda + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

07Annetaja

Doonori vanus
Loote