Skip to content
Tissue
Thận của thai nhi
Disease
Thận thai nhi bình thường (dòng tế bào đóng gói retrovirus; không gây ung thư)
Metastatic site
Không áp dụng (dòng tế bào đóng gói không gây ung thư)
Synonyms
ProPakA.6, PPA.6, PP-A.6

Documents

ProPak-A.6

Cell line · Product number 305599

€0.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

ProPak-A.6 (PPA.6) là một dòng tế bào đóng gói có nguồn gốc từ thận thai nhi người, được tạo ra để sản xuất các vectơ retrovirus không có khả năng nhân lên. ProPak-A.6 biểu hiện ổn định các trình tự E1A của adenovirus-5 (để kích hoạt phiên mã) cùng với các protein liên quan đến gag, pol và env có nguồn gốc từ virus bạch cầu chuột (MLV), cho phép đóng gói hiệu quả các bộ gen retrovirus tái tổ hợp vào các hạt virus dựa trên MLV không lây nhiễm. Phân loại GMO-S1 phản ánh sự tích hợp ổn định của các gen chuyển virus này.

ProPak-A.6 có thể được sử dụng làm dòng tế bào đóng gói để tạo ra các vectơ retrovirus tái tổ hợp dựa trên MLV có hiệu suất cao nhằm chuyển gen vào các tế bào đích. Dòng tế bào này được ứng dụng trong sản xuất vectơ liệu pháp gen, chuyển gen ổn định vào các quần thể tế bào đang phân chia, và các nghiên cứu yêu cầu việc chuyển gen hiệu quả bằng retrovirus. Thành phần E1A của adenovirus tăng cường biểu hiện do promoter điều khiển, từ đó nâng cao hiệu quả sản xuất virus. Người dùng cần tuân thủ các quy định an toàn sinh học áp dụng cho công việc với vectơ retrovirus ở mức BSL-2.

Tissue
Thận của thai nhi
Disease
Thận thai nhi bình thường (dòng tế bào đóng gói retrovirus; không gây ung thư)
Metastatic site
Không áp dụng (dòng tế bào đóng gói không gây ung thư)
Applications
Sản xuất vectơ retrovirus; sản xuất vectơ liệu pháp gen; chuyển gen ổn định vào các tế bào đang phân chia; truyền gen bằng retrovirus dựa trên MLV; đóng gói retrovirus với sự hỗ trợ của adenovirus; nghiên cứu chuyển gen
Synonyms
  • ProPakA.6
  • PPA.6
  • PP-A.6

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This human kidney-derived cell line (ProPaka.6) contains plasmid constructs encoding adenovirus-5 sequences together with gag-, pol-, and env-related proteins that form non-infectious murine leukemia virus particles. The inserts are stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
2

03Characteristics

Morphology
Tương tự biểu mô
Cell type
Tế bào biểu mô
Doubling time
khoảng 24 đến 36 giờ

04Identifiers

Citation
ProPak-A.6 (Mã sản phẩm Cytion 305599)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_8968

05Handling and culture

Culture medium
DMEM, chứa: 4,5 g/L glucose, chứa: 4 mM L-glutamine, chứa: 3,7 g/L NaHCO₃, chứa: 1,0 mM natri pyruvate (số hiệu sản phẩm Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.

Supplements
Bổ sung 10% huyết thanh bò phôi (FBS) vào môi trường nuôi cấy
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Loại bỏ môi trường nuôi cấy, rửa bằng PBS không chứa canxi và magiê, phủ Accutase lên, ủ trong 8–10 phút ở nhiệt độ phòng, hòa tan lại trong môi trường nuôi cấy, ly tâm ở 300×g trong 3 phút, loại bỏ phần dịch nổi, cấy lại vào môi trường nuôi cấy mới.
Split ratio
1 đến 5
Seeding density
2–4 × 10⁴/cm²
Fluid renewal
Cứ 1 đến 2 ngày một lần
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

06Quality control and cryopreservation

Freeze medium
Với tư cách là môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng môi trường tăng trưởng hoàn chỉnh + 10% DMSO để đảm bảo độ sống sót sau khi rã đông.
Storage conditions

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Shipping conditions

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

07Donor

Donor age
Thai nhi