- Tissue
- Thận của thai nhi
- Disease
- Thận thai nhi bình thường (dòng tế bào đóng gói retrovirus; không gây ung thư)
- Metastatic site
- Không áp dụng (dòng tế bào đóng gói không gây ung thư)
- Synonyms
- ProPakA.6, PPA.6, PP-A.6
Documents
ProPak-A.6
Cell line · Product number 305599
Customization / Recommendations
- ProPak-A.6Cell line€0.00
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
ProPak-A.6 (PPA.6) là một dòng tế bào đóng gói có nguồn gốc từ thận thai nhi người, được tạo ra để sản xuất các vectơ retrovirus không có khả năng nhân lên. ProPak-A.6 biểu hiện ổn định các trình tự E1A của adenovirus-5 (để kích hoạt phiên mã) cùng với các protein liên quan đến gag, pol và env có nguồn gốc từ virus bạch cầu chuột (MLV), cho phép đóng gói hiệu quả các bộ gen retrovirus tái tổ hợp vào các hạt virus dựa trên MLV không lây nhiễm. Phân loại GMO-S1 phản ánh sự tích hợp ổn định của các gen chuyển virus này.
ProPak-A.6 có thể được sử dụng làm dòng tế bào đóng gói để tạo ra các vectơ retrovirus tái tổ hợp dựa trên MLV có hiệu suất cao nhằm chuyển gen vào các tế bào đích. Dòng tế bào này được ứng dụng trong sản xuất vectơ liệu pháp gen, chuyển gen ổn định vào các quần thể tế bào đang phân chia, và các nghiên cứu yêu cầu việc chuyển gen hiệu quả bằng retrovirus. Thành phần E1A của adenovirus tăng cường biểu hiện do promoter điều khiển, từ đó nâng cao hiệu quả sản xuất virus. Người dùng cần tuân thủ các quy định an toàn sinh học áp dụng cho công việc với vectơ retrovirus ở mức BSL-2.
- Tissue
- Thận của thai nhi
- Disease
- Thận thai nhi bình thường (dòng tế bào đóng gói retrovirus; không gây ung thư)
- Metastatic site
- Không áp dụng (dòng tế bào đóng gói không gây ung thư)
- Applications
- Sản xuất vectơ retrovirus; sản xuất vectơ liệu pháp gen; chuyển gen ổn định vào các tế bào đang phân chia; truyền gen bằng retrovirus dựa trên MLV; đóng gói retrovirus với sự hỗ trợ của adenovirus; nghiên cứu chuyển gen
- Synonyms
- ProPakA.6
- PPA.6
- PP-A.6
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- GMO status
- GMO-S1
- GMO status details
- GMO-S1: This human kidney-derived cell line (ProPaka.6) contains plasmid constructs encoding adenovirus-5 sequences together with gag-, pol-, and env-related proteins that form non-infectious murine leukemia virus particles. The inserts are stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biosafety level
- 2
03Characteristics
- Morphology
- Tương tự biểu mô
- Cell type
- Tế bào biểu mô
- Doubling time
- khoảng 24 đến 36 giờ
04Identifiers
- Citation
- ProPak-A.6 (Mã sản phẩm Cytion 305599)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_8968
05Handling and culture
- Culture medium
- DMEM, chứa: 4,5 g/L glucose, chứa: 4 mM L-glutamine, chứa: 3,7 g/L NaHCO₃, chứa: 1,0 mM natri pyruvate (số hiệu sản phẩm Cytion 820300a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.
- Supplements
- Bổ sung 10% huyết thanh bò phôi (FBS) vào môi trường nuôi cấy
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- Loại bỏ môi trường nuôi cấy, rửa bằng PBS không chứa canxi và magiê, phủ Accutase lên, ủ trong 8–10 phút ở nhiệt độ phòng, hòa tan lại trong môi trường nuôi cấy, ly tâm ở 300×g trong 3 phút, loại bỏ phần dịch nổi, cấy lại vào môi trường nuôi cấy mới.
- Split ratio
- 1 đến 5
- Seeding density
- 2–4 × 10⁴/cm²
- Fluid renewal
- Cứ 1 đến 2 ngày một lần
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.
Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery
06Quality control and cryopreservation
- Freeze medium
- Với tư cách là môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng môi trường tăng trưởng hoàn chỉnh + 10% DMSO để đảm bảo độ sống sót sau khi rã đông.
- Storage conditions
Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.
- Shipping conditions
Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.
07Donor
- Donor age
- Thai nhi
08Legal and safety
- Safety precautions
- Khi lập kế hoạch lưu trữ ống cryovial trong nitơ lỏng để rã đông sau này, việc tuân thủ các biện pháp an toàn nghiêm ngặt là bắt buộc. Găng tay và quần áo bảo hộ phù hợp là điều cần thiết, và việc sử dụng khẩu trang hoặc kính bảo hộ là bắt buộc trong quá trình chuyển mẫu đông lạnh vào hoặc ra khỏi bể nitơ lỏng. Điều này nhằm giảm thiểu nguy cơ chấn thương do nổ ống cryovial khi lấy ra, có thể dẫn đến việc văng ra các mảnh vỡ sắc nhọn.
- Warranty
Tại Cytion, chúng tôi cam kết về chất lượng và khả năng sống của các sản phẩm của mình. Chúng tôi đảm bảo rằng các tế bào của chúng tôi sẽ có khả năng sống tại thời điểm bắt đầu nuôi cấy trong 60 ngày kể từ khi vận chuyển từ cơ sở của chúng tôi. Chúng tôi cam kết rằng tất cả các vật liệu tuân thủ các thông số kỹ thuật được mô tả trong Giấy chứng nhận phân tích và/hoặc Tài liệu sản phẩm.
Để biết chi tiết đầy đủ, vui lòng tham khảo <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Tuyên bố Bảo hành.
- Material Transfer Agreement required
- Yes