Pāriet uz saturu
Audums
Augļa nieres
Slimība
Normāla augļa nieres šūna (retrovirāla iepakošanas šūnu līnija; netumorogēna)
Metastāžu vieta
Neattiecas (iepakojuma šūnu līnija, kas neizraisa audzēju veidošanos)
Sinonīmi
ProPakA.6, PPA.6, PP-A.6

Dokumenti

ProPak-A.6

Cell line · Preces numurs 305599

€0.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

ProPak-A.6 (PPA.6) ir no cilvēka augļa nieres iegūta iepakošanas šūnu līnija, kas izveidota, lai ražotu replikācijas nespējīgus retrovirālos vektorus. ProPak-A.6 stabili ekspresē adenovīrusa-5 E1A sekvences (transkripcijas transaktivācijai) kopā ar gag-, pol- un env-saistītajiem proteīniem, kas iegūti no peles leikēmijas vīrusa (MLV), nodrošinot rekombinantā retrovirālā genoma efektīvu iepakošanu neinfekciozās MLV bāzes vīrusu daļiņās. GMO-S1 klasifikācija atspoguļo šo vīrusu transgēnu stabilo integrāciju.

ProPak-A.6 ir piemērota kā iepakošanas šūnu līnija, lai radītu augsta titra rekombinantus MLV bāzes retrovirālos vektorus gēnu pārnesšanai mērķa šūnās. To izmanto gēnu terapijas vektoru ražošanā, dalījošos šūnu populāciju stabilā transdukcijā un pētījumos, kuros nepieciešama efektīva transgēnu piegāde ar retrovīrusu starpniecību. Adenovīrusa E1A komponents pastiprina promotora vadīto ekspresiju, uzlabojot vīrusu ražošanas efektivitāti. Lietotājiem jāievēro piemērojamie bioloģiskās drošības noteikumi attiecībā uz darbu ar BSL-2 retrovirāliem vektoriem.

Audums
Augļa nieres
Slimība
Normāla augļa nieres šūna (retrovirāla iepakošanas šūnu līnija; netumorogēna)
Metastāžu vieta
Neattiecas (iepakojuma šūnu līnija, kas neizraisa audzēju veidošanos)
Pieteikumi
Retrovirālo vektoru ražošana; gēnu terapijas vektoru izgatavošana; dalījošos šūnu stabila transdukcija; MLV bāzēta retrovirāla gēnu piegāde; adenovīrusa palīdzībā veikta retrovirāla iepakošana; pētījumi gēnu pārneses jomā
Sinonīmi
  • ProPakA.6
  • PPA.6
  • PP-A.6

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
ĢMO statuss
GMO-S1
Sīkāka informācija par ĢMO statusu
GMO-S1: This human kidney-derived cell line (ProPaka.6) contains plasmid constructs encoding adenovirus-5 sequences together with gag-, pol-, and env-related proteins that form non-infectious murine leukemia virus particles. The inserts are stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloģiskās drošības līmenis
2

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlijveidīgs
Šūnu tips
Epitēlija šūnas
Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
aptuveni 24 līdz 36 stundas

04Identifikatori

Atsauce
ProPak-A.6 (Cytion kataloga numurs 305599)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_8968

05Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM, w: 4,5 g/l glikozes, w: 4 mM L-glutamīna, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM nātrija piruvāta (Cytion izstrādājuma numurs 820300a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemiet barotni, nomazgājiet ar PBS bez kalcija un magnija, pārklājiet ar Accutase, inkubējiet 8–10 minūtes istabas temperatūrā, atkārtoti suspendējiet barotnē, centrifugējiet 300×g 3 minūtes, izlejiet supernatantu, pārstādiet svaigā barotnē.
Sadalījuma attiecība
no 1 līdz 5
Sēšanas blīvums
2–4 × 10⁴/cm²
Šķidruma atjaunošana
Reizi 1–2 dienās
Atkausēšana un kultivēšana

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

06Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni + 10% DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

07Ziedotājs

Donora vecums
Auglis