الانتقال إلى المحتوى
الأنسجة
كلى الجنين
المرض
كلية جنينية طبيعية (سلالة خلوية لتعبئة الفيروسات العكسية؛ غير مسببة للأورام)
موقع الانتشار
لا ينطبق (سلالة خلايا تغليف غير مسببة للأورام)
المرادفات
ProPakA.6, PPA.6, PP-A.6

المستندات

ProPak-A.6

Cell line · رقم المنتج 305599

€0.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن

التخصيص / التوصيات

متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

ProPak-A.6 (PPA.6) هو خط خلوي للتعبئة مشتق من كلى جنين بشري، تم إنشاؤه لإنتاج ناقلات فيروسية رجعية غير قادرة على التكاثر. يعبر ProPak-A.6 بشكل مستقر عن تسلسلات E1A للفيروس الغدي 5 (من أجل التنشيط النسخي) جنبًا إلى جنب مع البروتينات المرتبطة بـ gag و pol و env والمشتقة من فيروس اللوكيميا الفئراني (MLV)، مما يتيح التعبئة الفعالة للجينومات الفيروسية العكسية المؤتلفة في جسيمات فيروسية غير معدية قائمة على فيروس اللوكيميا الفئراني (MLV). يعكس تصنيف GMO-S1 الاندماج المستقر لهذه الجينات الفيروسية المُستوردة.

يمكن استخدام ProPak-A.6 كخط خلوي للتعبئة لإنتاج ناقلات فيروسية رجعية مُعاد تجميعها قائمة على MLV ذات عيار عالٍ لنقل الجينات إلى الخلايا المستهدفة. ويُستخدم في إنتاج ناقلات العلاج الجيني، والتحويل الجيني المستقر لمجموعات الخلايا المنقسمة، والدراسات التي تتطلب توصيلًا فعالًا للجينات المُدرجة عبر الفيروسات الرجعية. يعزز مكون الفيروس الغدي E1A التعبير الذي يحركه المروج، مما يحسن كفاءة إنتاج الفيروس. يجب على المستخدمين اتباع لوائح السلامة الحيوية المعمول بها فيما يتعلق بالعمل مع ناقلات الفيروسات الرجعية من مستوى BSL-2.

الأنسجة
كلى الجنين
المرض
كلية جنينية طبيعية (سلالة خلوية لتعبئة الفيروسات العكسية؛ غير مسببة للأورام)
موقع الانتشار
لا ينطبق (سلالة خلايا تغليف غير مسببة للأورام)
التطبيقات
إنتاج ناقلات فيروسية عكسية؛ تصنيع ناقلات العلاج الجيني؛ النقل المستقر للجينات إلى الخلايا المنقسمة؛ توصيل الجينات بواسطة الفيروسات العكسية القائمة على فيروس MLV؛ تغليف الفيروسات العكسية بمساعدة الفيروس الغدي؛ أبحاث نقل الجينات
المرادفات
  • ProPakA.6
  • PPA.6
  • PP-A.6

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
أنثى
خصائص النمو
الملتزم
حالة الكائنات المعدلة وراثيًا
GMO-S1
تفاصيل حالة الكائنات المعدلة وراثيًا
GMO-S1: This human kidney-derived cell line (ProPaka.6) contains plasmid constructs encoding adenovirus-5 sequences together with gag-, pol-, and env-related proteins that form non-infectious murine leukemia virus particles. The inserts are stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
مستوى السلامة البيولوجية
2

03الخصائص

المورفولوجيا
شبيه بالظهارة
نوع الخلية
الخلايا الظهارية
زمن المضاعفة
حوالي 24 إلى 36 ساعة

04المعرّفات

المرجع
ProPak-A.6 (رقم الكتالوج لدى Cytion: 305599)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_8968

05التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
DMEM، ث: 4.5 جم/لتر جلوكوز، ث: 4 مليمتر جلوتامين، ث: 3.7 جم/لتر NaHCO3، ث: 1.0 مليمتر بيروفات الصوديوم (رقم المادة 820300a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
أزل الوسط، واغسله بمحلول PBS خالٍ من الكالسيوم والمغنيسيوم، ثم غطّه بمحلول Accutase، واحتفظ به في الحاضنة لمدة 8–10 دقائق في درجة حرارة الغرفة، وأعد تعليقه في الوسط، ثم قم بالطرد المركزي بسرعة 300×g لمدة 3 دقائق، وتخلص من السائل الفوقي، وأعد زرعه في وسط جديد.
نسبة التقسيم
من 1 إلى 5
كثافة البذر
2-4*10^4/سم²
تجديد السوائل
كل يوم أو يومين
إذابة الثلج والزراعة

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

06مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل + 10% DMSO للحصول على صلاحية كافية بعد ذوبان الجليد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

07المانح

عمر المتبرع
الجنين