Gå til innholdet
Vev
Fosterets nyre
Sykdom
Normal fosternyre (retroviral pakkecellelinje; ikke-tumorogen)
Metastaseområde
Ikke relevant (ikke-tumorogen emballasjecellelinje)
Synonymer
ProPakA.6, PPA.6, PP-A.6

Dokumenter

ProPak-A.6

Cell line · Produktnummer 305599

€0.00ekskl. mva. og frakt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

ProPak-A.6 (PPA.6) er en pakkecellelinje avledet fra menneskelig fosternyre, utviklet for produksjon av replikasjonsinkompetente retrovirale vektorer. ProPak-A.6 uttrykker stabilt adenovirus-5 E1A-sekvenser (for transkripsjonell transaktivering) sammen med gag-, pol- og env-relaterte proteiner avledet fra murint leukemivirus (MLV), noe som muliggjør effektiv pakking av rekombinante retrovirale genomer inn i ikke-smittsomme MLV-baserte viruspartikler. GMO-S1-klassifiseringen gjenspeiler den stabile integrasjonen av disse virale transgenene.

ProPak-A.6 kan brukes som en pakkecellelinje for å generere rekombinante MLV-baserte retrovirale vektorer med høy titer for genoverføring til målceller. Den brukes i produksjon av vektorer for genterapi, stabil transduksjon av delende cellepopulasjoner og studier som krever effektiv retroviral levering av transgener. Adenovirus-E1A-komponenten forsterker promotordrevet ekspresjon, noe som forbedrer den virale produksjonseffektiviteten. Brukere bør følge gjeldende biosikkerhetsforskrifter for arbeid med retrovirale vektorer på BSL-2-nivå.

Vev
Fosterets nyre
Sykdom
Normal fosternyre (retroviral pakkecellelinje; ikke-tumorogen)
Metastaseområde
Ikke relevant (ikke-tumorogen emballasjecellelinje)
Søknader
Produksjon av retrovirale vektorer; fremstilling av vektorer for genterapi; stabil transduksjon av delende celler; MLV-basert retroviral genoverføring; adenovirusassistert retroviral pakking; forskning på genoverføring
Synonymer
  • ProPakA.6
  • PPA.6
  • PP-A.6

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Kvinne
Vekstegenskaper
Tilhenger
GMO-status
GMO-S1
Detaljer om GMO-status
GMO-S1: This human kidney-derived cell line (ProPaka.6) contains plasmid constructs encoding adenovirus-5 sequences together with gag-, pol-, and env-related proteins that form non-infectious murine leukemia virus particles. The inserts are stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosikkerhetsnivå
2

03Egenskaper

Morfologi
Epitel-lignende
Celletype
Epitelceller
Fordoblingstid
ca. 24 til 36 timer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
ProPak-A.6 (Cytion-katalognummer 305599)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_8968

05Håndtering og kultur

Næringsmedium
DMEM, m: 4,5 g/L glukose, m: 4 mM L-glutamin, m: 3,7 g/L NaHCO3, m: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikkelnummer 820300a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern mediet, vask med PBS uten kalsium og magnesium, tilsett Accutase, inkuber i 8–10 minutter ved romtemperatur, resuspender i mediet, sentrifuger ved 300×g i 3 minutter, kast supernatanten, og så på nytt i ferskt medium.
Oppdelingsforhold
1 til 5
Såtetthet
2–4 × 10⁴/cm²
Væskefornyelse
Hver 1. til 2. dag
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

06Kvalitetskontroll og kryokonservering

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium + 10 % DMSO for å sikre tilstrekkelig levedyktighet etter opptining.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

07Donor

Donorens alder
Foster