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Tissue
Rein fœtal
Disease
Rein fœtal normal (lignée cellulaire d'encapsidation rétrovirale; non tumorigène)
Metastatic site
Sans objet (lignée cellulaire d'emballage non tumorigène)
Synonyms
ProPakA.6, PPA.6, PP-A.6

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ProPak-A.6

Cell line · Product number 305599

US$0.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

ProPak-A.6 (PPA.6) est une lignée cellulaire d’encapsidation dérivée de rein fœtal humain, mise au point pour la production de vecteurs rétroviraux incapables de se répliquer. ProPak-A.6 exprime de manière stable les séquences E1A de l’adénovirus de type 5 (pour la transactivation transcriptionnelle) ainsi que les protéines gag, pol et env dérivées du virus de la leucémie murine (MLV), ce qui permet un encapsidage efficace des génomes rétroviraux recombinants dans des particules virales non infectieuses à base de MLV. La classification GMO-S1 reflète l’intégration stable de ces transgènes viraux.

ProPak-A.6 peut être utilisée comme lignée cellulaire d’encapsidation pour la production de vecteurs rétroviraux recombinants à base de MLV à titre élevé, destinés au transfert de gènes dans des cellules cibles. Elle est utilisée dans la production de vecteurs de thérapie génique, la transduction stable de populations de cellules en division et les études nécessitant une délivrance rétrovirale efficace de transgènes. Le composant E1A de l’adénovirus renforce l’expression régulée par un promoteur, améliorant ainsi l’efficacité de la production virale. Les utilisateurs doivent respecter les règlements de biosécurité applicables aux travaux sur les vecteurs rétroviraux de niveau BSL-2.

Tissue
Rein fœtal
Disease
Rein fœtal normal (lignée cellulaire d'encapsidation rétrovirale; non tumorigène)
Metastatic site
Sans objet (lignée cellulaire d'emballage non tumorigène)
Applications
Production de vecteurs rétroviraux; fabrication de vecteurs de thérapie génique; transduction stable de cellules en division; administration de gènes par vecteur rétroviral à base de MLV; conditionnement de vecteurs rétroviraux assisté par adénovirus; recherche sur le transfert de gènes
Synonyms
  • ProPakA.6
  • PPA.6
  • PP-A.6

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This human kidney-derived cell line (ProPaka.6) contains plasmid constructs encoding adenovirus-5 sequences together with gag-, pol-, and env-related proteins that form non-infectious murine leukemia virus particles. The inserts are stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
2

03Characteristics

Morphology
De type épithélial
Cell type
Cellules épithéliales
Doubling time
environ 24 à 36 heures

04Identifiers

Citation
ProPak-A.6 (numéro de catalogue Cytion 305599)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_8968

05Handling and culture

Culture medium
DMEM, p/v : 4,5 g/L de glucose, p/v : 4 mM de L-glutamine, p/v : 3,7 g/L de NaHCO₃, p/v : 1,0 mM de pyruvate de sodium (référence Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée.

Supplements
Ajouter 10 % de FBS au milieu de culture
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Retirer le milieu, laver avec du PBS sans calcium ni magnésium, recouvrir d’Accutase, incuber pendant 8 à 10 minutes à température ambiante, remettre en suspension dans le milieu, centrifuger à 300 × g pendant 3 minutes, jeter le surnageant, réensemencer dans du milieu frais.
Split ratio
1 à 5
Seeding density
2 à 4 × 10⁴/cm²
Fluid renewal
Tous les 1 à 2 jours
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

06Quality control and cryopreservation

Freeze medium
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet additionné de 10 % de DMSO afin d’assurer une viabilité adéquate après décongélation.
Storage conditions

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Shipping conditions

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

07Donor

Donor age
Fœtus