Gå direkte til indholdet
Væv
Fosterets nyre
Sygdom
Normal fosternyre (retroviral pakkecellelinje; ikke-tumorigen)
Metastasested
Ikke relevant (ikke-tumorigenisk emballagecellelinje)
Synonymer
ProPakA.6, PPA.6, PP-A.6

Dokumenter

ProPak-A.6

Cell line · Varenummer 305599

€0.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

ProPak-A.6 (PPA.6) er en pakkecellelinje, der stammer fra menneskelige føtale nyrer, og som er udviklet til produktion af replikationsinkompetente retrovirale vektorer. ProPak-A.6 udtrykker stabilt adenovirus-5 E1A-sekvenser (til transkriptionel transaktivering) sammen med gag-, pol- og env-relaterede proteiner afledt af murint leukæmivirus (MLV), hvilket muliggør effektiv pakning af rekombinante retrovirale genomer i ikke-infektiøse MLV-baserede virale partikler. GMO-S1-klassificeringen afspejler den stabile integration af disse virale transgener.

ProPak-A.6 kan anvendes som en pakningscellelinje til fremstilling af rekombinante MLV-baserede retrovirale vektorer med høj titer til genoverførsel til målceller. Den anvendes til produktion af genterapivektorer, stabil transduktion af delende cellepopulationer og undersøgelser, der kræver effektiv retroviral levering af transgener. Adenovirus-E1A-komponenten forstærker promotordrevet ekspression, hvilket forbedrer den virale produktionseffektivitet. Brugere bør følge gældende biosikkerhedsbestemmelser for arbejde med retrovirale vektorer på BSL-2-niveau.

Væv
Fosterets nyre
Sygdom
Normal fosternyre (retroviral pakkecellelinje; ikke-tumorigen)
Metastasested
Ikke relevant (ikke-tumorigenisk emballagecellelinje)
Anvendelser
Produktion af retrovirale vektorer; fremstilling af vektorer til genterapi; stabil transduktion af delende celler; MLV-baseret retroviral genoverførsel; adenovirus-assisteret retroviral pakning; forskning i genoverførsel
Synonymer
  • ProPakA.6
  • PPA.6
  • PP-A.6

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Kvinde
Vækstegenskaber
Tilhænger
GMO-status
GMO-S1
Oplysninger om GMO-status
GMO-S1: This human kidney-derived cell line (ProPaka.6) contains plasmid constructs encoding adenovirus-5 sequences together with gag-, pol-, and env-related proteins that form non-infectious murine leukemia virus particles. The inserts are stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosikkerhedsniveau
2

03Egenskaber

Morfologi
Epitel-lignende
Celletype
Epitheliale celler
Fordoblingstid
ca. 24 til 36 timer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
ProPak-A.6 (Cytion-katalognummer 305599)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_8968

05Håndtering og opdræt

Næringsmedium
DMEM, w: 4,5 g/L glukose, w: 4 mM L-glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern mediet, vask med PBS uden calcium og magnesium, tilsæt Accutase, inkuber i 8–10 minutter ved stuetemperatur, resuspender i mediet, centrifuger ved 300×g i 3 minutter, fjern supernatanten, og udså igen i frisk medium.
Opdelingsforhold
1 til 5
Såtæthed
2–4 × 10⁴/cm²
Væskeudskiftning
Hver 1. til 2. dag
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

06Kvalitetskontrol og kryopræservering

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium + 10 % DMSO for at opnå tilstrækkelig levedygtighed efter optøning.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

07Donor

Donorens alder
Foster