- Væv
- Fosterets nyre
- Sygdom
- Normal fosternyre (retroviral pakkecellelinje; ikke-tumorigen)
- Metastasested
- Ikke relevant (ikke-tumorigenisk emballagecellelinje)
- Synonymer
- ProPakA.6, PPA.6, PP-A.6
Dokumenter
ProPak-A.6
Cell line · Varenummer 305599
Tilpasning / Anbefalinger
- ProPak-A.6Cell line€0.00
Anbefalet (det nyeste parti)
01Generelle oplysninger
- Beskrivelse
ProPak-A.6 (PPA.6) er en pakkecellelinje, der stammer fra menneskelige føtale nyrer, og som er udviklet til produktion af replikationsinkompetente retrovirale vektorer. ProPak-A.6 udtrykker stabilt adenovirus-5 E1A-sekvenser (til transkriptionel transaktivering) sammen med gag-, pol- og env-relaterede proteiner afledt af murint leukæmivirus (MLV), hvilket muliggør effektiv pakning af rekombinante retrovirale genomer i ikke-infektiøse MLV-baserede virale partikler. GMO-S1-klassificeringen afspejler den stabile integration af disse virale transgener.
ProPak-A.6 kan anvendes som en pakningscellelinje til fremstilling af rekombinante MLV-baserede retrovirale vektorer med høj titer til genoverførsel til målceller. Den anvendes til produktion af genterapivektorer, stabil transduktion af delende cellepopulationer og undersøgelser, der kræver effektiv retroviral levering af transgener. Adenovirus-E1A-komponenten forstærker promotordrevet ekspression, hvilket forbedrer den virale produktionseffektivitet. Brugere bør følge gældende biosikkerhedsbestemmelser for arbejde med retrovirale vektorer på BSL-2-niveau.
- Væv
- Fosterets nyre
- Sygdom
- Normal fosternyre (retroviral pakkecellelinje; ikke-tumorigen)
- Metastasested
- Ikke relevant (ikke-tumorigenisk emballagecellelinje)
- Anvendelser
- Produktion af retrovirale vektorer; fremstilling af vektorer til genterapi; stabil transduktion af delende celler; MLV-baseret retroviral genoverførsel; adenovirus-assisteret retroviral pakning; forskning i genoverførsel
- Synonymer
- ProPakA.6
- PPA.6
- PP-A.6
02Klassificering
- Organisme
- Menneske
- Køn
- Kvinde
- Vækstegenskaber
- Tilhænger
- GMO-status
- GMO-S1
- Oplysninger om GMO-status
- GMO-S1: This human kidney-derived cell line (ProPaka.6) contains plasmid constructs encoding adenovirus-5 sequences together with gag-, pol-, and env-related proteins that form non-infectious murine leukemia virus particles. The inserts are stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biosikkerhedsniveau
- 2
03Egenskaber
- Morfologi
- Epitel-lignende
- Celletype
- Epitheliale celler
- Fordoblingstid
- ca. 24 til 36 timer
04Identifikatorer
- Kildehenvisning
- ProPak-A.6 (Cytion-katalognummer 305599)
- NCBI-skattenummer
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_8968
05Håndtering og opdræt
- Næringsmedium
- DMEM, w: 4,5 g/L glukose, w: 4 mM L-glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikelnummer 820300a)
- Inkubationsatmosfære
37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.
- Kosttilskud
- Suppler mediet med 10% FBS
- Dissociationsreagens
- Accutase
- Oddyrkning
- Fjern mediet, vask med PBS uden calcium og magnesium, tilsæt Accutase, inkuber i 8–10 minutter ved stuetemperatur, resuspender i mediet, centrifuger ved 300×g i 3 minutter, fjern supernatanten, og udså igen i frisk medium.
- Opdelingsforhold
- 1 til 5
- Såtæthed
- 2–4 × 10⁴/cm²
- Væskeudskiftning
- Hver 1. til 2. dag
- Optøning og dyrkning
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.
Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery
06Kvalitetskontrol og kryopræservering
- Frysemedium
- Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium + 10 % DMSO for at opnå tilstrækkelig levedygtighed efter optøning.
- Opbevaringsbetingelser
For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.
- Leveringsbetingelser
Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.
07Donor
- Donorens alder
- Foster
08Juridiske forhold og sikkerhed
- Sikkerhedsforanstaltninger
- Når man planlægger at opbevare et kryovæske i flydende nitrogen med henblik på fremtidig optøning, er det obligatorisk at overholde strenge sikkerhedsforanstaltninger. Passende beskyttelseshandsker og -tøj er afgørende, og der skal bruges ansigtsmaske eller sikkerhedsbriller under overførslen af frosne prøver til eller fra tanken med flydende nitrogen. Dette er for at mindske risikoen for skader fra potentielle kryovæskeeksplosioner ved fjernelse, som kan resultere i projektion af skarpe fragmenter.
- Garanti
Hos Cytion står vi inde for vores produkters kvalitet og levedygtighed. Vi garanterer, at vores celler vil være levedygtige ved kulturens start i 60 dage efter afsendelse fra vores faciliteter. Vi sikrer, at alle materialer er i overensstemmelse med de specifikationer, der er beskrevet i analysecertifikatet og/eller produktarket
For alle detaljer henvises til vores <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring
- Der kræves en aftale om overførsel af materiale
- Ja