Preskoči na vsebino
Tkivo
Plodova ledvica
Bolezen
Normalna plodova ledvica (celična linija za pakiranje retrovirusov; netumorogena)
Mesto metastaze
Ni relevantno (embalirana celična linija, ki ne povzroča tumorjev)
Sinonimi
ProPakA.6, PPA.6, PP-A.6

Dokumenti

ProPak-A.6

Cell line · Številka izdelka 305599

€0.00brez davka in stroškov poštnine

Prilagajanje / Priporočila

Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

ProPak-A.6 (PPA.6) je linija pakirnih celic, pridobljena iz človeških fetalnih ledvic, ki je bila razvita za proizvodnjo retrovirusnih vektorjev, nesposobnih za replikacijo. ProPak-A.6 stabilno izraža sekvence adenovirusa 5 E1A (za transkripcijsko transaktivacijo) skupaj s proteini, povezanimi z gag, pol in env, ki izhajajo iz mišjega levkemijskega virusa (MLV), kar omogoča učinkovito pakiranje rekombinantnih retrovirusnih genomov v neinfektivne virusne delce na osnovi MLV. Razvrstitev GMO-S1 odraža stabilno integracijo teh virusnih transgenov.

ProPak-A.6 se uporablja kot celična linija za pakiranje pri proizvodnji rekombinantnih retrovirusnih vektorjev na osnovi MLV z visokim titrom za prenos genov v ciljne celice. Uporablja se pri proizvodnji vektorjev za gensko terapijo, stabilni transdukciji populacij delitvenih celic ter v študijah, ki zahtevajo učinkovito retrovirusno dostavo transgenov. Adenovirusna komponenta E1A okrepi promotorsko vodeno ekspresijo, s čimer izboljša učinkovitost proizvodnje virusov. Uporabniki morajo upoštevati veljavne predpise o biološki varnosti za delo z retrovirusnimi vektorji na ravni BSL-2.

Tkivo
Plodova ledvica
Bolezen
Normalna plodova ledvica (celična linija za pakiranje retrovirusov; netumorogena)
Mesto metastaze
Ni relevantno (embalirana celična linija, ki ne povzroča tumorjev)
Uporaba
Proizvodnja retrovirusnih vektorjev; izdelava vektorjev za gensko terapijo; stabilna transdukcija delitvenih celic; prenos genov z retrovirusom na osnovi MLV; pakiranje retrovirusov z pomočjo adenovirusa; raziskave na področju prenosa genov
Sinonimi
  • ProPakA.6
  • PPA.6
  • PP-A.6

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Ženska
Lastnosti rasti
Pripadnik
Status GSO
GMO-S1
Podrobnosti o statusu GSO
GMO-S1: This human kidney-derived cell line (ProPaka.6) contains plasmid constructs encoding adenovirus-5 sequences together with gag-, pol-, and env-related proteins that form non-infectious murine leukemia virus particles. The inserts are stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Stopnja biološke varnosti
2

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijam podobni
Vrsta celice
Epitelijske celice
Čas podvojitve
približno 24 do 36 ur

04Identifikatorji

Navajanje vira
ProPak-A.6 (kataloška številka Cytion 305599)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_8968

05Ravnanje in gojenje

Gojišče
DMEM, w: 4,5 g/L glukoze, w: 4 mM L-glutamina, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natrijevega piruvata (številka izdelka Cytion 820300a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite gojišče, sperite s PBS brez kalcija in magnezija, prekrijte z Accutase, inkubirajte 8–10 minut pri sobni temperaturi, ponovno suspendirajte v gojišču, centrifugirajte pri 300×g 3 minute, odlijte supernatant, ponovno posejte v sveže gojišče.
Razmerje delitve
1 do 5
Gostota setve
2–4 × 10⁴/cm²
Obnova tekočine
Vsak 1 do 2 dni
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

06Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za krioprezervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

07Donator

Starost darovalca
Plod