İçeriğe atla
Doku
Fetal böbrek
Hastalık
Normal fetal böbrek (retroviral paketleme hücre hattı; tümör oluşturucu değildir)
Metastaz yeri
Uygulanamaz (tümör oluşturmayan paketleme hücre hattı)
Eş anlamlılar
ProPakA.6, PPA.6, PP-A.6

Belgeler

ProPak-A.6

Cell line · Ürün numarası 305599

€0.00vergi ve kargo hariç

Kişiselleştirme / Öneriler

Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

ProPak-A.6 (PPA.6), replikasyon yeteneği olmayan retroviral vektörlerin üretimi için geliştirilmiş, insan fetal böbreğinden elde edilen bir paketleme hücre hattıdır. ProPak-A.6, adenovirüs-5 E1A dizilerini (transkripsiyonel transaktivasyon için) fare lösemi virüsünden (MLV) türetilen gag, pol ve env ile ilişkili proteinlerle birlikte stabil bir şekilde eksprese eder ve bu sayede rekombinant retroviral genomların enfeksiyöz olmayan MLV bazlı viral partiküllere verimli bir şekilde paketlenmesini sağlar. GMO-S1 sınıflandırması, bu viral transgenlerin stabil entegrasyonunu yansıtmaktadır.

ProPak-A.6, hedef hücrelere gen aktarımı için yüksek titreli rekombinant MLV tabanlı retroviral vektörlerin üretilmesinde paketleme hücre hattı olarak kullanılabilir. Gen terapisi vektör üretimi, bölünen hücre popülasyonlarının stabil transdüksiyonu ve transgenlerin verimli retroviral iletimini gerektiren çalışmalarda kullanılır. Adenovirüs E1A bileşeni, promotör kaynaklı ekspresyonu güçlendirerek viral üretim verimliliğini artırır. Kullanıcılar, BSL-2 retroviral vektör çalışmaları için geçerli biyogüvenlik yönetmeliklerine uymalıdır.

Doku
Fetal böbrek
Hastalık
Normal fetal böbrek (retroviral paketleme hücre hattı; tümör oluşturucu değildir)
Metastaz yeri
Uygulanamaz (tümör oluşturmayan paketleme hücre hattı)
Uygulamalar
Retroviral vektör üretimi; gen terapisi vektörünün üretimi; bölünen hücrelere kararlı transdüksiyon; MLV temelli retroviral gen aktarımı; adenovirüs destekli retroviral paketleme; gen transferi araştırmaları
Eş anlamlılar
  • ProPakA.6
  • PPA.6
  • PP-A.6

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Kadın
Büyüme özellikleri
Bağlı
GDO durumu
GMO-S1
GDO durumuna ilişkin ayrıntılar
GMO-S1: This human kidney-derived cell line (ProPaka.6) contains plasmid constructs encoding adenovirus-5 sequences together with gag-, pol-, and env-related proteins that form non-infectious murine leukemia virus particles. The inserts are stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biyogüvenlik seviyesi
2

03Özellikler

Morfoloji
Epitel benzeri
Hücre türü
Epitel hücreleri
İki katına çıkma süresi
yaklaşık 24 ila 36 saat

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
ProPak-A.6 (Cytion katalog numarası 305599)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_8968

05İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
DMEM, w: 4,5 g/L Glukoz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Sodyum piruvat (Cytion ürün numarası 820300a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Besiyerini çıkarın, kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın, Accutase ile kaplayın, oda sıcaklığında 8–10 dakika inkübe edin, besiyerinde yeniden süspansiyon haline getirin, 300×g’de 3 dakika santrifüjleyin, süpernatantı atın, taze besiyerine yeniden ekleyin.
Bölünme oranı
1'den 5'e kadar
Ekim yoğunluğu
2-4*10⁴/cm²
Sıvı değişimi
Her 1 ila 2 günde bir
Çözme ve kültürleme

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

06Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı + %10 DMSO kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

07Bağışçı

Bağışçının yaşı
Fetüs