Prejsť na obsah
Tkanivo
Plodová oblička
Choroba
Normálna fetálna oblička (retrovirová baliaca bunková línia; netumorogénna)
Miesto metastáz
Neplatí (nekarcinogénna baliaca bunková línia)
Synonymá
ProPakA.6, PPA.6, PP-A.6

Dokumenty

ProPak-A.6

Cell line · Číslo výrobku 305599

€0.00bez DPH a poštovného

Prispôsobenie / Odporúčania

Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

ProPak-A.6 (PPA.6) je balíková bunková línia odvodená z ľudskej fetálnej obličky, vytvorená na produkciu retrovirálnych vektorov neschopných replikácie. ProPak-A.6 stabilne exprimuje sekvencie E1A adenovírusu typu 5 (na transkripčnú transaktiváciu) spolu s proteínmi súvisiacimi s génmi gag, pol a env, ktoré pochádzajú z myšieho leukemického vírusu (MLV), čo umožňuje efektívne balenie rekombinantných retrovirových genómov do neinfekčných vírusových častíc na báze MLV. Klasifikácia GMO-S1 odzrkadľuje stabilnú integráciu týchto vírusových transgénov.

ProPak-A.6 je vhodný ako baliaca bunková línia na generovanie rekombinantných retrovirálnych vektorov na báze MLV s vysokým titrom pre génový transfer do cieľových buniek. Používa sa pri výrobe vektorov pre génovú terapiu, pri stabilnej transdukcii populácií deliacich sa buniek a pri štúdiách vyžadujúcich efektívne retrovirálne dodávanie transgénov. Adenovírusová zložka E1A zvyšuje expresiu riadenú promotérom, čím zlepšuje účinnosť produkcie vírusu. Používatelia by mali dodržiavať platné predpisy o biologickej bezpečnosti pre prácu s retrovirálnymi vektormi na úrovni BSL-2.

Tkanivo
Plodová oblička
Choroba
Normálna fetálna oblička (retrovirová baliaca bunková línia; netumorogénna)
Miesto metastáz
Neplatí (nekarcinogénna baliaca bunková línia)
Aplikácie
Výroba retrovirových vektorov; výroba vektorov pre génovú terapiu; stabilná transdukcia deliacich sa buniek; retrovirové dodávanie génov na báze MLV; balenie retrovirov s pomocou adenovírusu; výskum prenosu génov
Synonymá
  • ProPakA.6
  • PPA.6
  • PP-A.6

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Žena
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Stav GMO
GMO-S1
Podrobnosti o štatúte GMO
GMO-S1: This human kidney-derived cell line (ProPaka.6) contains plasmid constructs encoding adenovirus-5 sequences together with gag-, pol-, and env-related proteins that form non-infectious murine leukemia virus particles. The inserts are stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Úroveň biologickej bezpečnosti
2

03Charakteristiky

Morfológia
Epitelu podobné
Typ bunky
Epitelové bunky
Doba zdvojnásobenia
približne 24 až 36 hodín

04Identifikátory

Citácia
ProPak-A.6 (katalógové číslo Cytion 305599)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_8968

05Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutamínu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte médium, premyte PBS bez vápnika a horčíka, zalejte Accutase, inkubujte 8–10 minút pri izbovej teplote, resuspendujte v médiu, odstreďte pri 300×g po dobu 3 minút, supernatant zlikvidujte a znovu naočkujte do čerstvého média.
Pomer rozdelenia
1 až 5
Hustota výsevu
2–4 × 10⁴/cm²
Obnova kvapaliny
Každý 1 až 2 dni
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

06Kontrola kvality a kryokonzervácia

Mrazové médium
Ako médium na kryokonzerváciu používame kompletné rastové médium + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

07Darca

Vek darcu
Plod