Μετάβαση στο περιεχόμενο
Ιστός
Νεφρό εμβρύου
Ασθένεια
Φυσιολογικός νεφρός εμβρύου (κυτταρική σειρά συσκευασίας ρετροϊών· μη καρκινογόνος)
Θέση μετάστασης
Δεν ισχύει (μη ογκογόνος κυτταρική σειρά συσκευασίας)
Συνώνυμα
ProPakA.6, PPA.6, PP-A.6

Έγγραφα

ProPak-A.6

Cell line · Αριθμός προϊόντος 305599

€0.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής

Προσαρμογή / Προτάσεις

Σε απόθεμα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
  • CoA
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή

Το ProPak-A.6 (PPA.6) είναι μια κυτταρική σειρά συσκευασίας που προέρχεται από ανθρώπινο εμβρυϊκό νεφρό και έχει δημιουργηθεί για την παραγωγή ρετροϊικών φορέων χωρίς ικανότητα αναπαραγωγής. Η ProPak-A.6 εκφράζει σταθερά αλληλουχίες E1A του αδενοϊού-5 (για μεταγραφική ενεργοποίηση) μαζί με πρωτεΐνες που σχετίζονται με τα γονίδια gag, pol και env και προέρχονται από τον ιό της λευχαιμίας των ποντικών (MLV), επιτρέποντας την αποτελεσματική συσκευασία ανασυνδυασμένων ρετροϊικών γονιδιωμάτων σε μη μολυσματικά ιικά σωματίδια με βάση τον MLV. Η ταξινόμηση GMO-S1 αντανακλά τη σταθερή ενσωμάτωση αυτών των ιικών τρανσγονιδίων.

Το ProPak-A.6 μπορεί να χρησιμοποιηθεί ως κυτταρική σειρά συσκευασίας για τη δημιουργία ανασυνδυασμένων ρετροϊικών φορέων με βάση τον MLV υψηλού τίτλου για τη μεταφορά γονιδίων σε κύτταρα-στόχους. Χρησιμοποιείται στην παραγωγή φορέων γονιδιακής θεραπείας, στη σταθερή μεταγωγή πληθυσμών διαιρούμενων κυττάρων και σε μελέτες που απαιτούν αποτελεσματική ρετροϊική μεταφορά τρανσγονιδίων. Το συστατικό E1A του αδενοϊού ενισχύει την έκφραση που καθοδηγείται από τον προαγωγέα, βελτιώνοντας την αποδοτικότητα της ιικής παραγωγής. Οι χρήστες πρέπει να τηρούν τους ισχύοντες κανονισμούς βιοασφάλειας για εργασίες με ρετροϊκούς φορείς BSL-2.

Ιστός
Νεφρό εμβρύου
Ασθένεια
Φυσιολογικός νεφρός εμβρύου (κυτταρική σειρά συσκευασίας ρετροϊών· μη καρκινογόνος)
Θέση μετάστασης
Δεν ισχύει (μη ογκογόνος κυτταρική σειρά συσκευασίας)
Εφαρμογές
Παραγωγή ρετροϊικών φορέων· κατασκευή φορέων γονιδιακής θεραπείας· σταθερή μεταγωγή σε κύτταρα που διαιρούνται· μεταφορά γονιδίων μέσω ρετροϊών με βάση τον MLV· συσκευασία ρετροϊικών φορέων με τη βοήθεια αδενοϊού· έρευνα στη μεταφορά γονιδίων
Συνώνυμα
  • ProPakA.6
  • PPA.6
  • PP-A.6

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Άνθρωπος
Σεξ
Γυναίκα
Ιδιότητες ανάπτυξης
Πιστός
Κατάσταση όσον αφορά τους ΓΤΟ
GMO-S1
Λεπτομέρειες σχετικά με την κατάσταση των ΓΤΟ
GMO-S1: This human kidney-derived cell line (ProPaka.6) contains plasmid constructs encoding adenovirus-5 sequences together with gag-, pol-, and env-related proteins that form non-infectious murine leukemia virus particles. The inserts are stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Επίπεδο βιοασφάλειας
2

03Χαρακτηριστικά

Μορφολογία
Επιθηλιοειδής
Τύπος κυττάρου
Επιθηλιακά κύτταρα
Χρόνος διπλασιασμού
περίπου 24 έως 36 ώρες

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
ProPak-A.6 (αριθμός καταλόγου Cytion 305599)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
9606
Κελλοσαύρος
CVCL_8968

05Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
DMEM, w: 4,5 g/L γλυκόζη, w: 4 mM L-γλουταμίνη, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM πυρουβικό νάτριο (αριθμός άρθρου Cytion 820300a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 10% FBS
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Accutase
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Αφαιρέστε το μέσο, πλύνετε με PBS χωρίς ασβέστιο και μαγνήσιο, προσθέστε Accutase, επωάστε για 8–10 λεπτά σε θερμοκρασία δωματίου, αναδιαλύστε στο μέσο, φυγοκεντρήστε στα 300×g για 3 λεπτά, απορρίψτε τον υπερκείμενο, μεταφυτέψτε σε φρέσκο μέσο.
Αναλογία διαχωρισμού
1 έως 5
Πυκνότητα σποράς
2-4*10⁴/cm²
Ανανέωση υγρών
Κάθε 1 έως 2 ημέρες
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

06Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

07Δωρητής

Ηλικία δωρητή
Έμβρυο