Langsung ke isi
Tisu
Ginjal janin
Penyakit
Ginjal janin normal (garis sel pengemas retrovirus; tidak bersifat tumorigenik)
Lokasi metastasis
Tidak berlaku (garis sel kemasan yang tidak bersifat tumorigenik)
Sinonim
ProPakA.6, PPA.6, PP-A.6

Dokumen

ProPak-A.6

Cell line · Nomor produk 305599

€0.00belum termasuk pajak dan ongkos kirim

Penyesuaian / Rekomendasi

Tersedia
Lot
Direkomendasikan (stok terbaru)
  • CoA
1

01Informasi umum

Deskripsi

ProPak-A.6 (PPA.6) adalah lini sel pengemas yang berasal dari ginjal janin manusia, yang dikembangkan untuk produksi vektor retrovirus yang tidak mampu bereplikasi. ProPak-A.6 secara stabil mengekspresikan urutan E1A adenovirus-5 (untuk transaktivasi transkripsi) bersama dengan protein terkait gag, pol, dan env yang berasal dari virus leukemia tikus (MLV), sehingga memungkinkan pengemasan genom retrovirus rekombinan secara efisien ke dalam partikel virus berbasis MLV yang tidak menular. Klasifikasi GMO-S1 mencerminkan integrasi stabil dari transgen virus tersebut.

ProPak-A.6 dapat digunakan sebagai garis sel pengemasan untuk menghasilkan vektor retrovirus berbasis MLV rekombinan dengan titer tinggi guna transfer gen ke sel target. Vektor ini digunakan dalam produksi vektor terapi gen, transduksi stabil pada populasi sel yang sedang membelah, serta penelitian yang memerlukan pengiriman transgen secara efisien melalui retrovirus. Komponen E1A adenovirus meningkatkan ekspresi yang didorong oleh promotor, sehingga meningkatkan efisiensi produksi virus. Pengguna harus mematuhi peraturan biosafety yang berlaku untuk pekerjaan vektor retrovirus pada tingkat BSL-2.

Tisu
Ginjal janin
Penyakit
Ginjal janin normal (garis sel pengemas retrovirus; tidak bersifat tumorigenik)
Lokasi metastasis
Tidak berlaku (garis sel kemasan yang tidak bersifat tumorigenik)
Aplikasi
Produksi vektor retroviral; pembuatan vektor terapi gen; transduksi stabil pada sel yang sedang membelah; pengantaran gen retroviral berbasis MLV; pengemasan retroviral dengan bantuan adenovirus; penelitian transfer gen
Sinonim
  • ProPakA.6
  • PPA.6
  • PP-A.6

02Klasifikasi

Organisme
Manusia
Seks
Perempuan
Sifat-sifat pertumbuhan
Pengikut
Status GMO
GMO-S1
Rincian status GMO
GMO-S1: This human kidney-derived cell line (ProPaka.6) contains plasmid constructs encoding adenovirus-5 sequences together with gag-, pol-, and env-related proteins that form non-infectious murine leukemia virus particles. The inserts are stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Tingkat keamanan hayati
2

03Karakteristik

Morfologi
Seperti epitel
Jenis sel
Sel epitel
Waktu penggandaan
sekitar 24 hingga 36 jam

04Pengidentifikasi

Referensi
ProPak-A.6 (nomor katalog Cytion 305599)
Nomor Identifikasi Pajak NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_8968

05Penanganan dan budidaya

Media kultur
DMEM, w: 4,5 g/L Glukosa, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natrium piruvat (Nomor artikel Cytion 820300a)
Suasana inkubasi

37°C, 5%CO2, atmosfer yang dilembabkan.

Suplemen
Tambahkan media dengan 10% FBS
Reagen disosiasi
Accutase
Perbanyakan sel
Buang medium, cuci dengan PBS tanpa kalsium dan magnesium, tutupi dengan Accutase, inkubasi selama 8–10 menit pada suhu kamar, resuspensi dalam medium, sentrifugasi pada 300×g selama 3 menit, buang supernatan, tanam kembali dalam medium segar.
Rasio pemisahan
1 sampai 5
Kepadatan penanaman
2–4 × 10⁴/cm²
Pergantian cairan
Setiap 1 hingga 2 hari
Pencairan dan pembiakan

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

06Pengendalian mutu dan kriopreservasi

Media pembekuan
Sebagai media kriopreservasi, kami menggunakan media pertumbuhan lengkap + 10% DMSO untuk kelangsungan hidup pasca-pencairan yang memadai.
Kondisi penyimpanan

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Ketentuan pengiriman

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

07Donatur

Usia donor
Janin