Přejít na obsah
Tkáň
Fetální ledvina
Nemoc
Normální fetální ledvina (retrovirová balicí buněčná linie; netumorogenní)
Místo metastázy
Neplatí (netumorogenní balicí buněčná linie)
Synonyma
ProPakA.6, PPA.6, PP-A.6

Dokumenty

ProPak-A.6

Cell line · Číslo výrobku 305599

€0.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

ProPak-A.6 (PPA.6) je balicí buněčná linie odvozená z lidské fetální ledviny, vytvořená pro produkci retrovirových vektorů neschopných replikace. ProPak-A.6 stabilně exprimuje sekvence E1A adenoviru typu 5 (pro transkripční transaktivaci) společně s proteiny souvisejícími s gag, pol a env odvozenými z myšího leukemického viru (MLV), což umožňuje účinné balení rekombinantních retrovirových genomů do neinfekčních virových částic na bázi MLV. Klasifikace GMO-S1 odráží stabilní integraci těchto virových transgenů.

ProPak-A.6 je použitelná jako balicí buněčná linie pro generování rekombinantních retrovirových vektorů na bázi MLV s vysokým titrem pro genový přenos do cílových buněk. Používá se při výrobě vektorů pro genovou terapii, při stabilní transdukci populací dělících se buněk a ve studiích vyžadujících účinné retrovirové doručení transgenů. Adenovirová složka E1A zvyšuje expresi řízenou promotorem, čímž zlepšuje účinnost produkce viru. Uživatelé by měli dodržovat platné předpisy o biologické bezpečnosti pro práci s retrovirovými vektory na úrovni BSL-2.

Tkáň
Fetální ledvina
Nemoc
Normální fetální ledvina (retrovirová balicí buněčná linie; netumorogenní)
Místo metastázy
Neplatí (netumorogenní balicí buněčná linie)
Aplikace
Výroba retrovirových vektorů; výroba vektorů pro genovou terapii; stabilní transdukce dělících se buněk; retrovirové přenosy genů na bázi MLV; balení retrovirových vektorů za pomoci adenovirů; výzkum přenosu genů
Synonyma
  • ProPakA.6
  • PPA.6
  • PP-A.6

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Žena
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Stav GMO
GMO-S1
Podrobnosti o statusu GMO
GMO-S1: This human kidney-derived cell line (ProPaka.6) contains plasmid constructs encoding adenovirus-5 sequences together with gag-, pol-, and env-related proteins that form non-infectious murine leukemia virus particles. The inserts are stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Úroveň biologické bezpečnosti
2

03Charakteristika

Morfologie
Epitelu podobné
Typ buňky
Epitelové buňky
Doba zdvojnásobení
přibližně 24 až 36 hodin

04Identifikátory

Citace
ProPak-A.6 (katalogové číslo Cytion 305599)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_8968

05Manipulace a chov

Pěstovací médium
DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutaminu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte médium, promyjte PBS bez vápníku a hořčíku, zalijte Accutase, inkubujte 8–10 minut při pokojové teplotě, resuspendujte v médiu, odstřeďte při 300×g po dobu 3 minut, supernatant vylijte a znovu naočkujte do čerstvého média.
Poměr rozdělení
1 až 5
Hustota výsevu
2–4 × 10⁴/cm²
Obnova tekutin
Každý 1 až 2 dny
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

06Kontrola kvality a kryokonzervace

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium + 10% DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

07Dárce

Věk dárce
Plod