- Tissue
- Rim fetal
- Disease
- Rim fetal normal (linha celular de empacotamento retroviral; não tumorigênica)
- Metastatic site
- Não aplicável (linha celular de embalagem não tumorigênica)
- Synonyms
- ProPakA.6, PPA.6, PP-A.6
Documents
ProPak-A.6
Cell line · Product number 305599
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
A ProPak-A.6 (PPA.6) é uma linhagem celular de empacotamento derivada de rim fetal humano, criada para a produção de vetores retrovirais incapazes de se replicar. A ProPak-A.6 expressa de forma estável sequências E1A do adenovírus 5 (para transativação transcricional), juntamente com proteínas relacionadas a gag, pol e env derivadas do vírus da leucemia murina (MLV), permitindo o empacotamento eficiente de genomas retrovirais recombinantes em partículas virais não infecciosas baseadas no MLV. A classificação GMO-S1 reflete a integração estável desses transgenes virais.
O ProPak-A.6 é aplicável como linha celular de empacotamento para a geração de vetores retrovirais recombinantes baseados em MLV de alto título para transferência gênica em células-alvo. É utilizado na produção de vetores para terapia gênica, na transdução estável de populações de células em divisão e em estudos que exigem a entrega retroviral eficiente de transgenes. O componente E1A do adenovírus potencializa a expressão dirigida por promotor, melhorando a eficiência da produção viral. Os usuários devem seguir as normas de biossegurança aplicáveis ao trabalho com vetores retrovirais em nível BSL-2.
- Tissue
- Rim fetal
- Disease
- Rim fetal normal (linha celular de empacotamento retroviral; não tumorigênica)
- Metastatic site
- Não aplicável (linha celular de embalagem não tumorigênica)
- Applications
- Produção de vetores retrovirais; fabricação de vetores para terapia gênica; transdução estável de células em divisão; entrega de genes por vetores retrovirais baseados no MLV; empacotamento retroviral assistido por adenovírus; pesquisa em transferência gênica
- Synonyms
- ProPakA.6
- PPA.6
- PP-A.6
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- GMO status
- GMO-S1
- GMO status details
- GMO-S1: This human kidney-derived cell line (ProPaka.6) contains plasmid constructs encoding adenovirus-5 sequences together with gag-, pol-, and env-related proteins that form non-infectious murine leukemia virus particles. The inserts are stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biosafety level
- 2
03Characteristics
- Morphology
- De tipo epitelial
- Cell type
- Células epiteliais
- Doubling time
- aproximadamente 24 a 36 horas
04Identifiers
- Citation
- ProPak-A.6 (número de catálogo da Cytion 305599)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_8968
05Handling and culture
- Culture medium
- DMEM, p/v: 4,5 g/L de glicose, p/v: 4 mM de L-glutamina, p/v: 3,7 g/L de NaHCO₃, p/v: 1,0 mM de piruvato de sódio (número de artigo da Cytion 820300a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.
- Supplements
- Adicione 10% de FBS ao meio
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- Remova o meio, lave com PBS sem cálcio e magnésio, cubra com Accutase, incube por 8 a 10 minutos à temperatura ambiente, ressuspenda no meio, centrifugue a 300×g por 3 minutos, descarte o sobrenadante e replante em meio fresco.
- Split ratio
- 1 a 5
- Seeding density
- 2-4*10⁴/cm²
- Fluid renewal
- A cada 1 ou 2 dias
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.
Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery
06Quality control and cryopreservation
- Freeze medium
- Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo + 10% de DMSO para garantir uma viabilidade adequada após o descongelamento.
- Storage conditions
Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.
- Shipping conditions
As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.
07Donor
- Donor age
- Feto
08Legal and safety
- Safety precautions
- Ao planejar o armazenamento de um criotubo em nitrogênio líquido para descongelamento futuro, é obrigatório seguir medidas de segurança rigorosas. É essencial o uso de luvas e roupas de proteção adequadas, além do uso obrigatório de máscara facial ou óculos de proteção durante a transferência de amostras congeladas para dentro ou para fora do tanque de nitrogênio líquido. Isso visa mitigar o risco de ferimentos decorrentes de possíveis explosões dos criotubos durante a remoção, o que pode resultar na projeção de fragmentos pontiagudos.
- Warranty
Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.
Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.
- Material Transfer Agreement required
- Yes