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Tissue
Rim fetal
Disease
Rim fetal normal (linha celular de empacotamento retroviral; não tumorigênica)
Metastatic site
Não aplicável (linha celular de embalagem não tumorigênica)
Synonyms
ProPakA.6, PPA.6, PP-A.6

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ProPak-A.6

Cell line · Product number 305599

US$0.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

A ProPak-A.6 (PPA.6) é uma linhagem celular de empacotamento derivada de rim fetal humano, criada para a produção de vetores retrovirais incapazes de se replicar. A ProPak-A.6 expressa de forma estável sequências E1A do adenovírus 5 (para transativação transcricional), juntamente com proteínas relacionadas a gag, pol e env derivadas do vírus da leucemia murina (MLV), permitindo o empacotamento eficiente de genomas retrovirais recombinantes em partículas virais não infecciosas baseadas no MLV. A classificação GMO-S1 reflete a integração estável desses transgenes virais.

O ProPak-A.6 é aplicável como linha celular de empacotamento para a geração de vetores retrovirais recombinantes baseados em MLV de alto título para transferência gênica em células-alvo. É utilizado na produção de vetores para terapia gênica, na transdução estável de populações de células em divisão e em estudos que exigem a entrega retroviral eficiente de transgenes. O componente E1A do adenovírus potencializa a expressão dirigida por promotor, melhorando a eficiência da produção viral. Os usuários devem seguir as normas de biossegurança aplicáveis ao trabalho com vetores retrovirais em nível BSL-2.

Tissue
Rim fetal
Disease
Rim fetal normal (linha celular de empacotamento retroviral; não tumorigênica)
Metastatic site
Não aplicável (linha celular de embalagem não tumorigênica)
Applications
Produção de vetores retrovirais; fabricação de vetores para terapia gênica; transdução estável de células em divisão; entrega de genes por vetores retrovirais baseados no MLV; empacotamento retroviral assistido por adenovírus; pesquisa em transferência gênica
Synonyms
  • ProPakA.6
  • PPA.6
  • PP-A.6

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This human kidney-derived cell line (ProPaka.6) contains plasmid constructs encoding adenovirus-5 sequences together with gag-, pol-, and env-related proteins that form non-infectious murine leukemia virus particles. The inserts are stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
2

03Characteristics

Morphology
De tipo epitelial
Cell type
Células epiteliais
Doubling time
aproximadamente 24 a 36 horas

04Identifiers

Citation
ProPak-A.6 (número de catálogo da Cytion 305599)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_8968

05Handling and culture

Culture medium
DMEM, p/v: 4,5 g/L de glicose, p/v: 4 mM de L-glutamina, p/v: 3,7 g/L de NaHCO₃, p/v: 1,0 mM de piruvato de sódio (número de artigo da Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

Supplements
Adicione 10% de FBS ao meio
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Remova o meio, lave com PBS sem cálcio e magnésio, cubra com Accutase, incube por 8 a 10 minutos à temperatura ambiente, ressuspenda no meio, centrifugue a 300×g por 3 minutos, descarte o sobrenadante e replante em meio fresco.
Split ratio
1 a 5
Seeding density
2-4*10⁴/cm²
Fluid renewal
A cada 1 ou 2 dias
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

06Quality control and cryopreservation

Freeze medium
Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo + 10% de DMSO para garantir uma viabilidade adequada após o descongelamento.
Storage conditions

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

Shipping conditions

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

07Donor

Donor age
Feto