- Tissue
- כליה עוברית
- Disease
- כליה עוברית תקינה (קו תאים לאריזה רטרו-ויראלית; שאינה גורמת לגידולים)
- Metastatic site
- לא רלוונטי (קו תאים אריזה שאינו גורם לגידולים)
- Synonyms
- ProPakA.6, PPA.6, PP-A.6
Documents
ProPak-A.6
Cell line · Product number 305599
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
ProPak-A.6 (PPA.6) הוא קו תאים ארוזים שמקורו בכליות עובר אנושי, שנוצר לצורך ייצור וקטורים רטרו-ויראליים חסרי יכולת שכפול. ProPak-A.6 מבטא באופן יציב רצפים של E1A מאדנו-וירוס 5 (לצורך טרנס-אקטיבציה של שעתוק) יחד עם חלבונים הקשורים ל-gag, pol ו-env שמקורם בנגיף לוקמיה עכברי (MLV), מה שמאפשר אריזה יעילה של גנומים רטרו-ויראליים רקומביננטיים לחלקיקים ויראליים לא מדבקים המבוססים על MLV. סיווג ה-GMO-S1 משקף את השילוב היציב של טרנסגנים נגיפיים אלה.
ProPak-A.6 מתאים כקו תאים לאריזה ליצירת וקטורים רטרו-ויראליים רקומביננטיים מבוססי MLV בעלי טיטר גבוה להעברת גנים לתאי מטרה. הוא משמש לייצור וקטורים לטיפול גנטי, להעברה יציבה של אוכלוסיות תאים מתחלקות, ולמחקרים הדורשים העברה רטרו-ויראלית יעילה של טרנסגנים. הרכיב E1A של האדנו-וירוס משפר את הביטוי המונע על ידי הפרומוטור, ובכך משפר את יעילות ייצור הנגיף. על המשתמשים לנהוג על פי תקנות הבטיחות הביולוגית החלות על עבודה עם וקטורים רטרו-ויראליים ברמת BSL-2.
- Tissue
- כליה עוברית
- Disease
- כליה עוברית תקינה (קו תאים לאריזה רטרו-ויראלית; שאינה גורמת לגידולים)
- Metastatic site
- לא רלוונטי (קו תאים אריזה שאינו גורם לגידולים)
- Applications
- ייצור וקטורים רטרו-ויראליים; ייצור וקטורים לטיפול גנטי; העברה גנטית יציבה לתאים מתחלקים; העברת גנים רטרו-ויראלית מבוססת MLV; אריזה רטרו-ויראלית בסיוע אדנו-וירוס; מחקר בתחום העברת גנים
- Synonyms
- ProPakA.6
- PPA.6
- PP-A.6
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- GMO status
- GMO-S1
- GMO status details
- GMO-S1: This human kidney-derived cell line (ProPaka.6) contains plasmid constructs encoding adenovirus-5 sequences together with gag-, pol-, and env-related proteins that form non-infectious murine leukemia virus particles. The inserts are stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biosafety level
- 2
03Characteristics
- Morphology
- דמוי אפיתל
- Cell type
- תאי אפיתל
- Doubling time
- כ-24 עד 36 שעות
04Identifiers
- Citation
- ProPak-A.6 (מספר קטלוג של Cytion: 305599)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_8968
05Handling and culture
- Culture medium
- DMEM, w: 4.5 g/L גלוקוז, w: 4 mM L-גלוטמין, w: 3.7 g/L NaHCO3, w: 1.0 mM נתרן פירובט (מספר קטלוגי Cytion 820300a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, אווירה לחה.
- Supplements
- הוסף לתווך 10% FBS
- Dissociation reagent
- אקוטאז
- Subculturing
- יש להסיר את התרבית מהמדיום, לשטוף אותה ב-PBS ללא סידן ומגנזיום, לכסות ב-Accutase, להניח באינקובטור למשך 8–10 דקות בטמפרטורת החדר, להחזיר את התאים לתמיסה במדיום, לסובב בצנטריפוגה ב-300×g למשך 3 דקות, לשפוך את הנוזל העליון, ולשתול מחדש במדיום טרי.
- Split ratio
- 1 עד 5
- Seeding density
- 2–4*10^4/סמ"ר
- Fluid renewal
- כל יום או יומיים
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.
Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery
06Quality control and cryopreservation
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
07Donor
- Donor age
- עובר
08Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Material Transfer Agreement required
- Yes