Skip to content
Tissue
כליה עוברית
Disease
כליה עוברית תקינה (קו תאים לאריזה רטרו-ויראלית; שאינה גורמת לגידולים)
Metastatic site
לא רלוונטי (קו תאים אריזה שאינו גורם לגידולים)
Synonyms
ProPakA.6, PPA.6, PP-A.6

Documents

ProPak-A.6

Cell line · Product number 305599

US$0.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

ProPak-A.6 (PPA.6) הוא קו תאים ארוזים שמקורו בכליות עובר אנושי, שנוצר לצורך ייצור וקטורים רטרו-ויראליים חסרי יכולת שכפול. ProPak-A.6 מבטא באופן יציב רצפים של E1A מאדנו-וירוס 5 (לצורך טרנס-אקטיבציה של שעתוק) יחד עם חלבונים הקשורים ל-gag, pol ו-env שמקורם בנגיף לוקמיה עכברי (MLV), מה שמאפשר אריזה יעילה של גנומים רטרו-ויראליים רקומביננטיים לחלקיקים ויראליים לא מדבקים המבוססים על MLV. סיווג ה-GMO-S1 משקף את השילוב היציב של טרנסגנים נגיפיים אלה.

ProPak-A.6 מתאים כקו תאים לאריזה ליצירת וקטורים רטרו-ויראליים רקומביננטיים מבוססי MLV בעלי טיטר גבוה להעברת גנים לתאי מטרה. הוא משמש לייצור וקטורים לטיפול גנטי, להעברה יציבה של אוכלוסיות תאים מתחלקות, ולמחקרים הדורשים העברה רטרו-ויראלית יעילה של טרנסגנים. הרכיב E1A של האדנו-וירוס משפר את הביטוי המונע על ידי הפרומוטור, ובכך משפר את יעילות ייצור הנגיף. על המשתמשים לנהוג על פי תקנות הבטיחות הביולוגית החלות על עבודה עם וקטורים רטרו-ויראליים ברמת BSL-2.

Tissue
כליה עוברית
Disease
כליה עוברית תקינה (קו תאים לאריזה רטרו-ויראלית; שאינה גורמת לגידולים)
Metastatic site
לא רלוונטי (קו תאים אריזה שאינו גורם לגידולים)
Applications
ייצור וקטורים רטרו-ויראליים; ייצור וקטורים לטיפול גנטי; העברה גנטית יציבה לתאים מתחלקים; העברת גנים רטרו-ויראלית מבוססת MLV; אריזה רטרו-ויראלית בסיוע אדנו-וירוס; מחקר בתחום העברת גנים
Synonyms
  • ProPakA.6
  • PPA.6
  • PP-A.6

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This human kidney-derived cell line (ProPaka.6) contains plasmid constructs encoding adenovirus-5 sequences together with gag-, pol-, and env-related proteins that form non-infectious murine leukemia virus particles. The inserts are stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
2

03Characteristics

Morphology
דמוי אפיתל
Cell type
תאי אפיתל
Doubling time
כ-24 עד 36 שעות

04Identifiers

Citation
ProPak-A.6 (מספר קטלוג של Cytion: 305599)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_8968

05Handling and culture

Culture medium
DMEM, w: 4.5 g/L גלוקוז, w: 4 mM L-גלוטמין, w: 3.7 g/L NaHCO3, w: 1.0 mM נתרן פירובט (מספר קטלוגי Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתווך 10% FBS
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
יש להסיר את התרבית מהמדיום, לשטוף אותה ב-PBS ללא סידן ומגנזיום, לכסות ב-Accutase, להניח באינקובטור למשך 8–10 דקות בטמפרטורת החדר, להחזיר את התאים לתמיסה במדיום, לסובב בצנטריפוגה ב-300×g למשך 3 דקות, לשפוך את הנוזל העליון, ולשתול מחדש במדיום טרי.
Split ratio
1 עד 5
Seeding density
2–4*10^4/סמ"ר
Fluid renewal
כל יום או יומיים
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

06Quality control and cryopreservation

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

07Donor

Donor age
עובר