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Tecido
Rim fetal
Doença
Rim fetal normal (linha celular de empacotamento retroviral; não tumorigénica)
Local da metástase
Não aplicável (linha celular de embalagem não tumorigénica)
Sinónimos
ProPakA.6, PPA.6, PP-A.6

Documentos

ProPak-A.6

Cell line · Número do produto 305599

€0.00sem impostos nem portes de envio

Personalização / Recomendações

Em stock
Lote
Recomendado (lote mais recente)
  • CoA
1

01Informações gerais

Descrição

A ProPak-A.6 (PPA.6) é uma linha celular de empacotamento derivada de rim fetal humano, criada para a produção de vetores retrovirais incapazes de se replicar. A ProPak-A.6 expressa de forma estável sequências E1A do adenovírus 5 (para transativação transcricional), juntamente com proteínas relacionadas com gag, pol e env derivadas do vírus da leucemia murina (MLV), permitindo o empacotamento eficiente de genomas retrovirais recombinantes em partículas virais não infecciosas baseadas no MLV. A classificação GMO-S1 reflete a integração estável destes transgenes virais.

O ProPak-A.6 é aplicável como linha celular de empacotamento para a geração de vetores retrovirais recombinantes baseados em MLV de alto título para a transferência genética para células-alvo. É utilizado na produção de vetores de terapia genética, na transdução estável de populações de células em divisão e em estudos que requeiram a entrega retroviral eficiente de transgenes. O componente E1A do adenovírus potencia a expressão induzida por promotor, melhorando a eficiência da produção viral. Os utilizadores devem seguir os regulamentos de biossegurança aplicáveis ao trabalho com vetores retrovirais em BSL-2.

Tecido
Rim fetal
Doença
Rim fetal normal (linha celular de empacotamento retroviral; não tumorigénica)
Local da metástase
Não aplicável (linha celular de embalagem não tumorigénica)
Aplicações
Produção de vetores retrovirais; fabrico de vetores para terapia genética; transdução estável de células em divisão; entrega de genes por meio de vetores retrovirais baseados no MLV; empacotamento retroviral assistido por adenovírus; investigação sobre transferência genética
Sinónimos
  • ProPakA.6
  • PPA.6
  • PP-A.6

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Feminino
Propriedades de crescimento
Aderente
Estatuto em matéria de OGM
GMO-S1
Detalhes sobre o estatuto dos OGM
GMO-S1: This human kidney-derived cell line (ProPaka.6) contains plasmid constructs encoding adenovirus-5 sequences together with gag-, pol-, and env-related proteins that form non-infectious murine leukemia virus particles. The inserts are stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Nível de biossegurança
2

03Características

Morfologia
De tipo epitelial
Tipo de célula
Células epiteliais
Tempo de duplicação
aprox. 24 a 36 horas

04Identificadores

Referência
ProPak-A.6 (número de catálogo da Cytion 305599)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_8968

05Manuseamento e cultura

Meio de cultura
DMEM, com: 4,5 g/L de glucose, com: 4 mM de L-Glutamina, com: 3,7 g/L de NaHCO3, com: 1,0 mM de piruvato de sódio (número de artigo Cytion 820300a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio, lavar com PBS sem cálcio nem magnésio, cobrir com Accutase, incubar durante 8 a 10 minutos à temperatura ambiente, ressuspender no meio, centrifugar a 300×g durante 3 minutos, descartar o sobrenadante e repovoar em meio fresco.
Rácio de divisão
1 a 5
Densidade de sementeira
2-4*10⁴/cm²
Renovação de fluidos
A cada 1 ou 2 dias
Descongelamento e cultura

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

06Controlo de qualidade e criopreservação

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo + 10% de DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

07Doador

Idade do dador
Feto