Tartalomra ugrás
Szövet
Magzati vese
Betegség
Normális magzati vese (retrovirális csomagoló sejtvonal; nem tumorigenikus)
Áttétes hely
Nem alkalmazható (nem tumorigenikus csomagoló sejtvonal)
Szinonimák
ProPakA.6, PPA.6, PP-A.6

Dokumentumok

ProPak-A.6

Cell line · Termékszám 305599

€0.00adó és szállítási költség nélkül

Személyre szabás / Ajánlások

Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

A ProPak-A.6 (PPA.6) egy emberi magzati veséből származó csomagoló sejtvonal, amelyet replikációra képtelen retrovirális vektorok előállítására hoztak létre. A ProPak-A.6 stabilan expresszálja az adenovírus-5 E1A szekvenciáit (a transzkripciós transaktivációhoz), valamint az egér leukémia vírusból (MLV) származó gag-, pol- és env-kapcsolódó fehérjéket, lehetővé téve a rekombináns retrovirális genomok hatékony csomagolását nem fertőző, MLV-alapú vírusrészecskékbe. A GMO-S1 besorolás ezeknek a vírusos transzgéneknek a stabil integrációját tükrözi.

A ProPak-A.6 csomagoló sejtvonalként alkalmazható nagy titerű, rekombináns MLV-alapú retrovirális vektorok előállítására, amelyek célsejtekbe történő génátvitelre szolgálnak. Használják génterápiás vektorok előállításához, osztódó sejtpopulációk stabil transzdukciójához, valamint olyan kutatásokhoz, amelyek a transzgének hatékony retrovirális bejuttatását igénylik. Az adenovírus E1A komponens fokozza a promóter által vezérelt expressziót, javítva ezzel a vírustermelés hatékonyságát. A felhasználóknak be kell tartaniuk a BSL-2 szintű retrovirális vektorokkal végzett munkára vonatkozó biológiai biztonsági előírásokat.

Szövet
Magzati vese
Betegség
Normális magzati vese (retrovirális csomagoló sejtvonal; nem tumorigenikus)
Áttétes hely
Nem alkalmazható (nem tumorigenikus csomagoló sejtvonal)
Alkalmazások
Retrovirális vektorok előállítása; génterápiás vektorok gyártása; osztódó sejtek stabil transzdukciója; MLV-alapú retrovirális génbejuttatás; adenovírussal támogatott retrovirális csomagolás; génátvitel-kutatás
Szinonimák
  • ProPakA.6
  • PPA.6
  • PP-A.6

02Osztályozás

Organizmus
Ember
Szex
Nő
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
GMO-státusz
GMO-S1
A GMO-státuszra vonatkozó részletek
GMO-S1: This human kidney-derived cell line (ProPaka.6) contains plasmid constructs encoding adenovirus-5 sequences together with gag-, pol-, and env-related proteins that form non-infectious murine leukemia virus particles. The inserts are stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biológiai biztonsági szint
2

03Jellemzők

Morfológia
Epithelszerű
Sejttípus
Epithel sejtek
Kettőzési idő
kb. 24–36 óra

04Azonosítók

Hivatkozás
ProPak-A.6 (Cytion katalógusszám: 305599)
NCBI adóazonosító szám
9606
Cellosaurus
CVCL_8968

05Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
DMEM, w: 4,5 g/L glükóz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM nátrium-piruvát (Cytion cikkszám 820300a)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsuk el a tápközeget, mossuk le kalcium- és magnéziummentes PBS-sel, öntsünk rá Accutase-t, inkubáljuk 8–10 percig szobahőmérsékleten, szuszpendáljuk újra a tápközegben, centrifugáljuk 300×g-vel 3 percig, öntsük ki a felülúszót, majd ültessük át friss tápközegbe.
Osztási arány
1–5
Ültetési sűrűség
2–4 × 10⁴/cm²
Folyadékcsere
1–2 naponta
Felolvasztás és tenyésztés

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

06Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

07Adományozó

Az adományozó életkora
Magzat