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Gewebe
Fötale Niere
Krankheit
Normale fötale Niere (retrovirale Verpackungszelllinie; nicht tumorogen)
Metastasenherd
Nicht zutreffend (nicht tumorogene Verpackungszelllinie)
Synonyme
ProPakA.6, PPA.6, PP-A.6

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ProPak-A.6

Cell line · Artikelnummer 305599

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

ProPak-A.6 (PPA.6) ist eine aus menschlichen fötalen Nieren gewonnene Verpackungszelllinie, die für die Herstellung replikationsinkompetenter retroviraler Vektoren entwickelt wurde. ProPak-A.6 exprimiert stabil Adenovirus-5-E1A-Sequenzen (zur Transkriptionstransaktivierung) zusammen mit gag-, pol- und env-verwandten Proteinen, die vom murinen Leukämievirus (MLV) stammen, und ermöglicht so die effiziente Verpackung rekombinanter retroviraler Genome in nicht-infektiöse, MLV-basierte Viruspartikel. Die GMO-S1-Klassifizierung spiegelt die stabile Integration dieser viralen Transgene wider.

ProPak-A.6 eignet sich als Verpackungszelllinie zur Herstellung von rekombinanten, MLV-basierten retroviralen Vektoren mit hohem Titer für den Gentransfer in Zielzellen. Sie wird bei der Herstellung von Gentherapie-Vektoren, der stabilen Transduktion sich teilender Zellpopulationen sowie bei Studien eingesetzt, die eine effiziente retrovirale Übertragung von Transgenen erfordern. Die Adenovirus-E1A-Komponente verstärkt die promotorgesteuerte Expression und verbessert so die Effizienz der Virusproduktion. Anwender sollten die geltenden Biosicherheitsvorschriften für die Arbeit mit retroviralen Vektoren der Sicherheitsstufe BSL-2 befolgen.

Gewebe
Fötale Niere
Krankheit
Normale fötale Niere (retrovirale Verpackungszelllinie; nicht tumorogen)
Metastasenherd
Nicht zutreffend (nicht tumorogene Verpackungszelllinie)
Anwendungen
Herstellung retroviraler Vektoren; Herstellung von Vektoren für die Gentherapie; stabile Transduktion sich teilender Zellen; MLV-basierter retroviraler Gentransfer; adenovirusgestützte retrovirale Verpackung; Forschung zum Gentransfer
Synonyme
  • ProPakA.6
  • PPA.6
  • PP-A.6

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Weiblich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
GVO-Status
GMO-S1
Angaben zum GVO-Status
GMO-S1: This human kidney-derived cell line (ProPaka.6) contains plasmid constructs encoding adenovirus-5 sequences together with gag-, pol-, and env-related proteins that form non-infectious murine leukemia virus particles. The inserts are stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biologische Sicherheitsstufe
2

03Merkmale

Morphologie
Epithelähnlich
Zelltyp
Epithelzellen
Verdopplungszeit
ca. 24 bis 36 Stunden

04Bezeichner

Quellenangabe
ProPak-A.6 (Cytion-Katalognummer 305599)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_8968

05Handhabung und Kultur

Nährmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvat (Cytion-Artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Medium entfernen, mit PBS ohne Kalzium und Magnesium waschen, mit Accutase bedecken, 8–10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, in Medium resuspendieren, 3 Minuten bei 300×g zentrifugieren, Überstand verwerfen, in frisches Medium ausplattieren.
Split-Verhältnis
1 bis 5
Aussaatdichte
2–4 × 10⁴/cm²
Flüssigkeitswechsel
Alle 1 bis 2 Tage
Auftauen und Kultivierung

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

06Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir vollständiges Wachstumsmedium + 10 % DMSO, um eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen zu gewährleisten.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

07Spender

Alter des Spenders
Fötus