Ga naar de inhoud
Weefsel
Foetale nier
Ziekte
Normale foetale nier (retrovirale verpakkingscellijn; niet-tumorogene)
Plaats van uitzaaiingen
Niet van toepassing (niet-tumorogene verpakkingscellijn)
Synoniemen
ProPakA.6, PPA.6, PP-A.6

Documenten

ProPak-A.6

Cell line · Productnummer 305599

€0.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

ProPak-A.6 (PPA.6) is een uit menselijke foetale nieren afkomstige verpakkingscellijn die is ontwikkeld voor de productie van retrovirale vectoren die niet in staat zijn tot replicatie. ProPak-A.6 brengt op stabiele wijze adenovirus-5 E1A-sequenties tot expressie (voor transactivatie van de transcriptie), samen met gag-, pol- en env-gerelateerde eiwitten afkomstig van het muizenleukemievirus (MLV), waardoor een efficiënte verpakking van recombinante retrovirale genomen in niet-infectieuze, op MLV gebaseerde virale deeltjes mogelijk wordt. De GMO-S1-classificatie weerspiegelt de stabiele integratie van deze virale transgenen.

ProPak-A.6 is geschikt als verpakkingscellijn voor het genereren van recombinante, op MLV gebaseerde retrovirale vectoren met een hoge titer voor genoverdracht naar doelcellen. Het wordt gebruikt bij de productie van vectoren voor gentherapie, de stabiele transductie van delende celpopulaties en studies waarbij een efficiënte retrovirale afgifte van transgenen vereist is. De E1A-component van het adenovirus versterkt de promotor-gestuurde expressie, waardoor de efficiëntie van de virale productie wordt verbeterd. Gebruikers dienen de geldende voorschriften inzake bioveiligheid voor werkzaamheden met retrovirale vectoren op BSL-2-niveau na te leven.

Weefsel
Foetale nier
Ziekte
Normale foetale nier (retrovirale verpakkingscellijn; niet-tumorogene)
Plaats van uitzaaiingen
Niet van toepassing (niet-tumorogene verpakkingscellijn)
Toepassingen
Productie van retrovirale vectoren; vervaardiging van vectoren voor gentherapie; stabiele transductie van delende cellen; retrovirale genafgifte op basis van MLV; retrovirale verpakking met behulp van adenovirussen; onderzoek naar genoverdracht
Synoniemen
  • ProPakA.6
  • PPA.6
  • PP-A.6

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Vrouw
Groei-eigenschappen
Aanhanger
GGO-status
GMO-S1
Details over de GGO-status
GMO-S1: This human kidney-derived cell line (ProPaka.6) contains plasmid constructs encoding adenovirus-5 sequences together with gag-, pol-, and env-related proteins that form non-infectious murine leukemia virus particles. The inserts are stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioveiligheidsniveau
2

03Kenmerken

Morfologie
Epitheelachtig
Celtype
Epitheelcellen
Verdubbelingstijd
ongeveer 24 tot 36 uur

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
ProPak-A.6 (Cytion-catalogusnummer 305599)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_8968

05Behandeling en kweek

Kweekmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamine, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvaat (Cytion artikelnummer 820300a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het medium, was de cellen met PBS zonder calcium en magnesium, bedek ze met Accutase, incubeer 8–10 min bij kamertemperatuur, resuspendeer in medium, centrifugeer 300×g gedurende 3 min, gooi het supernatant weg en zaai de cellen opnieuw uit in vers medium.
Splitsingsverhouding
1 tot en met 5
Zaaidichtheid
2-4*10⁴/cm²
Vloeistofverversing
Om de 1 à 2 dagen
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

06Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

07Donateur

Leeftijd van de donor
Foetus