Siirry sisältöön
Kudos
Sikiön munuainen
Sairaus
Normaali sikiön munuainen (retroviraalinen pakkaussolulinja; ei-kasvainta aiheuttava)
Metastaasikohde
Ei sovelleta (ei-kasvainta aiheuttava pakkaussolulinja)
Synonyymit
ProPakA.6, PPA.6, PP-A.6

Asiakirjat

ProPak-A.6

Cell line · Tuotenumero 305599

€0.00ilman veroja ja toimituskuluja

Räätälöinti / Suositukset

Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

ProPak-A.6 (PPA.6) on ihmisen sikiön munuaisista peräisin oleva pakkaussolulinja, joka on kehitetty replikaatiokyvyttömien retrovirusvektoreiden tuotantoa varten. ProPak-A.6 ilmentää stabiilisti adenoviruksen 5 E1A-sekvenssejä (transkription transaktivaatiota varten) yhdessä hiiren leukemiaviruksesta (MLV) peräisin olevien gag-, pol- ja env-proteiinien kanssa, mikä mahdollistaa rekombinanttien retroviraalisten genomien tehokkaan pakkaamisen tarttumattomiin MLV-pohjaisiin viruspartikkeleihin. GMO-S1-luokitus kuvastaa näiden virusperäisten transgeenien vakaata integraatiota.

ProPak-A.6 soveltuu pakkaussolulinjaksi korkean titerin rekombinanttien MLV-pohjaisten retrovirusvektoreiden tuottamiseen geeninsiirtoa varten kohdesoluihin. Sitä käytetään geeniterapiavektorien tuotannossa, jakautuvien solupopulaatioiden vakaassa transduktiossa sekä tutkimuksissa, joissa tarvitaan transgeenien tehokasta retrovirusvälitteistä siirtoa. Adenoviruksen E1A-komponentti tehostaa promootterin ohjaamaa ilmentymistä, mikä parantaa virustuotannon tehokkuutta. Käyttäjien tulee noudattaa BSL-2-tason retroviraalivektorityöhön sovellettavia bioturvallisuusmääräyksiä.

Kudos
Sikiön munuainen
Sairaus
Normaali sikiön munuainen (retroviraalinen pakkaussolulinja; ei-kasvainta aiheuttava)
Metastaasikohde
Ei sovelleta (ei-kasvainta aiheuttava pakkaussolulinja)
Sovellukset
Retroviraalisten vektoreiden tuotanto; geeniterapiavektoreiden valmistus; jakautuvien solujen vakaa transduktio; MLV-pohjainen retroviraalinen geeninsiirto; adenoviruksen avulla tapahtuva retroviraalinen pakkaus; geeninsiirtotutkimus
Synonyymit
  • ProPakA.6
  • PPA.6
  • PP-A.6

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Nainen
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
GMO-status
GMO-S1
GMO-statuksen tiedot
GMO-S1: This human kidney-derived cell line (ProPaka.6) contains plasmid constructs encoding adenovirus-5 sequences together with gag-, pol-, and env-related proteins that form non-infectious murine leukemia virus particles. The inserts are stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioturvallisuustaso
2

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteelin kaltainen
Solutyyppi
Epiteelisolut
Kaksinkertaistumisaika
noin 24–36 tuntia

04Tunnisteet

Lähdeviite
ProPak-A.6 (Cytionin tuotenumero 305599)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_8968

05Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
DMEM, w: 4,5 g/l glukoosia, w: 4 mM L-glutamiinia, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvaattia (Cytionin artikkelinumero 820300a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista elatusaine, pese PBS-liuoksella, josta on poistettu kalsium ja magnesium, lisää Accutasea, inkuboi 8–10 minuuttia huoneenlämmössä, suspendoi uudelleen elatusaineeseen, sentrifugoi 300×g:ssa 3 minuuttia, heitä supernatantti pois ja siirrä solut uuteen elatusaineeseen.
Jakosuhde
1–5
Kylvötiheys
2–4 × 10⁴/cm²
Nesteen uusiminen
1–2 päivän välein
Sulatus ja viljely

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

06Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa + 10 % DMSO:ta, jotta elinkelpoisuus olisi riittävä sulatuksen jälkeen.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

07Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
Sikiö