- Tessuto
- Rene fetale
- Malattia
- Rene fetale normale (linea cellulare di impacchettamento retrovirale; non tumorigenica)
- Sito metastatico
- Non applicabile (linea cellulare di confezionamento non tumorigenica)
- Sinonimi
- ProPakA.6, PPA.6, PP-A.6
Documenti
ProPak-A.6
Cell line · Codice prodotto 305599
Personalizzazione / Suggerimenti
- ProPak-A.6Cell line€0.00
Consigliati (partita più recente)
01Informazioni generali
- Descrizione
ProPak-A.6 (PPA.6) è una linea cellulare di confezionamento derivata da rene fetale umano, generata per la produzione di vettori retrovirali incapaci di replicarsi. ProPak-A.6 esprime in modo stabile sequenze E1A dell’adenovirus 5 (per la transattivazione trascrizionale) insieme a proteine correlate a gag, pol ed env derivate dal virus della leucemia murina (MLV), consentendo un efficiente impacchettamento dei genomi retrovirali ricombinanti in particelle virali non infettive basate sull’MLV. La classificazione GMO-S1 riflette l’integrazione stabile di questi transgeni virali.
ProPak-A.6 è utilizzabile come linea cellulare di impacchettamento per la generazione di vettori retrovirali ricombinanti basati su MLV ad alto titolo per il trasferimento genico nelle cellule bersaglio. Viene impiegata nella produzione di vettori per la terapia genica, nella trasduzione stabile di popolazioni cellulari in divisione e in studi che richiedono un efficiente trasporto retrovirale dei transgeni. Il componente E1A dell’adenovirus potenzia l’espressione guidata dal promotore, migliorando l’efficienza della produzione virale. Gli utenti devono attenersi alle normative di biosicurezza applicabili per le attività con vettori retrovirali in ambiente BSL-2.
- Tessuto
- Rene fetale
- Malattia
- Rene fetale normale (linea cellulare di impacchettamento retrovirale; non tumorigenica)
- Sito metastatico
- Non applicabile (linea cellulare di confezionamento non tumorigenica)
- Applicazioni
- Produzione di vettori retrovirali; produzione di vettori per la terapia genica; trasduzione stabile di cellule in divisione; veicolazione genica retrovirale basata sull’MLV; confezionamento retrovirale assistito da adenovirus; ricerca sul trasferimento genico
- Sinonimi
- ProPakA.6
- PPA.6
- PP-A.6
02Classificazione
- Organismo
- Umano
- Sesso
- Donna
- Proprietà di crescita
- Aderente
- Presenza di OGM
- GMO-S1
- Dettagli sullo stato degli OGM
- GMO-S1: This human kidney-derived cell line (ProPaka.6) contains plasmid constructs encoding adenovirus-5 sequences together with gag-, pol-, and env-related proteins that form non-infectious murine leukemia virus particles. The inserts are stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Livello di biosicurezza
- 2
03Caratteristiche
- Morfologia
- Simile all'epitelio
- Tipo di cellula
- Cellule epiteliali
- Tempo di raddoppio
- circa da 24 a 36 ore
04Identificatori
- Riferimento bibliografico
- ProPak-A.6 (codice catalogo Cytion 305599)
- Codice fiscale NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_8968
05Manipolazione e coltura
- Terreno di coltura
- DMEM, w: 4,5 g/L di glucosio, w: 4 mM di L-Glutammina, w: 3,7 g/L di NaHCO3, w: 1,0 mM di piruvato di sodio (articolo Cytion numero 820300a)
- Atmosfera di incubazione
37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.
- Integratori
- Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
- Reagente di dissociazione
- Accutase
- Subcoltura
- Rimuovere il terreno di coltura, lavare con PBS privo di calcio e magnesio, coprire con Accutase, incubare per 8–10 min a temperatura ambiente, risospendere nel terreno di coltura, centrifugare a 300×g per 3 min, eliminare il surnatante, ripiantare in terreno di coltura fresco.
- Rapporto di frazionamento
- Da 1 a 5
- Densità di semina
- 2-4*10^4/cm²
- Rinnovo dei fluidi
- Ogni 1 o 2 giorni
- Scongelamento e coltura
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.
Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery
06Controllo di qualità e crioconservazione
- Terreno di coltura congelato
- Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo + 10% DMSO per ottenere un'adeguata vitalità post-scongelamento.
- Condizioni di conservazione
Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.
- Condizioni di spedizione
Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.
07Donatore
- Età dei donatori
- Feto
08Aspetti legali e di sicurezza
- Misure di sicurezza
- Quando si prevede di conservare una crioviale in azoto liquido per un futuro scongelamento, è obbligatorio attenersi a rigorose misure di sicurezza. Guanti e indumenti protettivi appropriati sono essenziali e l'uso di una maschera facciale o di occhiali di sicurezza è richiesto durante il trasferimento dei campioni congelati da o verso il serbatoio di azoto liquido. Questo per ridurre il rischio di lesioni dovute a potenziali esplosioni di crioviali al momento della rimozione, che possono provocare la proiezione di frammenti taglienti.
- Garanzia
Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto
Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia
- È richiesto un accordo di trasferimento di materiale
- Sì