Vai al contenuto
Tessuto
Rene fetale
Malattia
Rene fetale normale (linea cellulare di impacchettamento retrovirale; non tumorigenica)
Sito metastatico
Non applicabile (linea cellulare di confezionamento non tumorigenica)
Sinonimi
ProPakA.6, PPA.6, PP-A.6

Documenti

ProPak-A.6

Cell line · Codice prodotto 305599

€0.00IVA e spese di spedizione escluse

Personalizzazione / Suggerimenti

Disponibile
Lotto
Consigliati (partita più recente)
  • CoA
1

01Informazioni generali

Descrizione

ProPak-A.6 (PPA.6) è una linea cellulare di confezionamento derivata da rene fetale umano, generata per la produzione di vettori retrovirali incapaci di replicarsi. ProPak-A.6 esprime in modo stabile sequenze E1A dell’adenovirus 5 (per la transattivazione trascrizionale) insieme a proteine correlate a gag, pol ed env derivate dal virus della leucemia murina (MLV), consentendo un efficiente impacchettamento dei genomi retrovirali ricombinanti in particelle virali non infettive basate sull’MLV. La classificazione GMO-S1 riflette l’integrazione stabile di questi transgeni virali.

ProPak-A.6 è utilizzabile come linea cellulare di impacchettamento per la generazione di vettori retrovirali ricombinanti basati su MLV ad alto titolo per il trasferimento genico nelle cellule bersaglio. Viene impiegata nella produzione di vettori per la terapia genica, nella trasduzione stabile di popolazioni cellulari in divisione e in studi che richiedono un efficiente trasporto retrovirale dei transgeni. Il componente E1A dell’adenovirus potenzia l’espressione guidata dal promotore, migliorando l’efficienza della produzione virale. Gli utenti devono attenersi alle normative di biosicurezza applicabili per le attività con vettori retrovirali in ambiente BSL-2.

Tessuto
Rene fetale
Malattia
Rene fetale normale (linea cellulare di impacchettamento retrovirale; non tumorigenica)
Sito metastatico
Non applicabile (linea cellulare di confezionamento non tumorigenica)
Applicazioni
Produzione di vettori retrovirali; produzione di vettori per la terapia genica; trasduzione stabile di cellule in divisione; veicolazione genica retrovirale basata sull’MLV; confezionamento retrovirale assistito da adenovirus; ricerca sul trasferimento genico
Sinonimi
  • ProPakA.6
  • PPA.6
  • PP-A.6

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Donna
Proprietà di crescita
Aderente
Presenza di OGM
GMO-S1
Dettagli sullo stato degli OGM
GMO-S1: This human kidney-derived cell line (ProPaka.6) contains plasmid constructs encoding adenovirus-5 sequences together with gag-, pol-, and env-related proteins that form non-infectious murine leukemia virus particles. The inserts are stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Livello di biosicurezza
2

03Caratteristiche

Morfologia
Simile all'epitelio
Tipo di cellula
Cellule epiteliali
Tempo di raddoppio
circa da 24 a 36 ore

04Identificatori

Riferimento bibliografico
ProPak-A.6 (codice catalogo Cytion 305599)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_8968

05Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
DMEM, w: 4,5 g/L di glucosio, w: 4 mM di L-Glutammina, w: 3,7 g/L di NaHCO3, w: 1,0 mM di piruvato di sodio (articolo Cytion numero 820300a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il terreno di coltura, lavare con PBS privo di calcio e magnesio, coprire con Accutase, incubare per 8–10 min a temperatura ambiente, risospendere nel terreno di coltura, centrifugare a 300×g per 3 min, eliminare il surnatante, ripiantare in terreno di coltura fresco.
Rapporto di frazionamento
Da 1 a 5
Densità di semina
2-4*10^4/cm²
Rinnovo dei fluidi
Ogni 1 o 2 giorni
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

06Controllo di qualità e crioconservazione

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo + 10% DMSO per ottenere un'adeguata vitalità post-scongelamento.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

07Donatore

Età dei donatori
Feto