Przejdź do treści
Chusteczka
Nerka płodu
Choroba
Prawidłowa nerka płodu (linia komórkowa służąca do pakowania retrowirusów; nie wywołująca nowotworów)
Miejsce przerzutów
Nie dotyczy (linia komórkowa opakowaniowa niepowodująca nowotworów)
Synonimy
ProPakA.6, PPA.6, PP-A.6

Dokumenty

ProPak-A.6

Cell line · Numer produktu 305599

€0.00bez podatku i kosztów wysyłki

Dostosowanie / Zalecenia

W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

ProPak-A.6 (PPA.6) to linia komórek pakujących pochodząca z ludzkiej nerki płodowej, stworzona do produkcji wektorów retrowirusowych niezdolnych do replikacji. ProPak-A.6 stabilnie ekspresjonuje sekwencje E1A adenowirusa typu 5 (w celu transaktywacji transkrypcji) wraz z białkami powiązanymi z gag, pol i env pochodzącymi z mysiego wirusa białaczki (MLV), umożliwiając skuteczne pakowanie rekombinowanych genomów retrowirusowych do nieinfekcyjnych cząstek wirusowych opartych na MLV. Klasyfikacja GMO-S1 odzwierciedla stabilną integrację tych wirusowych transgenów.

ProPak-A.6 może być stosowana jako linia komórkowa do pakowania w celu wytwarzania wektorów retrowirusowych opartych na MLV o wysokim mianie, przeznaczonych do transferu genów do komórek docelowych. Jest wykorzystywana w produkcji wektorów do terapii genowej, stabilnej transdukcji populacji komórek dzielących się oraz w badaniach wymagających skutecznego dostarczania transgenów za pomocą retrowirusów. Składnik adenowirusowy E1A wzmacnia ekspresję sterowaną promotorem, poprawiając wydajność produkcji wirusowej. Użytkownicy powinni przestrzegać obowiązujących przepisów dotyczących bezpieczeństwa biologicznego przy pracy z wektorami retrowirusowymi na poziomie BSL-2.

Chusteczka
Nerka płodu
Choroba
Prawidłowa nerka płodu (linia komórkowa służąca do pakowania retrowirusów; nie wywołująca nowotworów)
Miejsce przerzutów
Nie dotyczy (linia komórkowa opakowaniowa niepowodująca nowotworów)
Zastosowania
Produkcja wektorów retrowirusowych; wytwarzanie wektorów do terapii genowej; stabilna transdukcja komórek dzielących się; retrowirusowe dostarczanie genów z wykorzystaniem wirusa MLV; pakowanie wektorów retrowirusowych z wykorzystaniem adenowirusa; badania nad transferem genów
Synonimy
  • ProPakA.6
  • PPA.6
  • PP-A.6

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Kobieta
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Status GMO
GMO-S1
Szczegółowe informacje dotyczące statusu GMO
GMO-S1: This human kidney-derived cell line (ProPaka.6) contains plasmid constructs encoding adenovirus-5 sequences together with gag-, pol-, and env-related proteins that form non-infectious murine leukemia virus particles. The inserts are stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
2

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Podobny do nabłonka
Typ komórki
Komórki nabłonkowe
Czas podwojenia
ok. 24–36 godzin

04Identyfikatory

Źródło
ProPak-A.6 (numer katalogowy Cytion 305599)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_8968

05Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
DMEM, w: 4,5 g/l glukozy, w: 4 mM L-glutaminy, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pirogronianu sodu (numer artykułu Cytion 820300a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usunąć pożywkę, przemyć komórki roztworem PBS bez wapnia i magnezu, zalać preparatem Accutase, inkubować przez 8–10 minut w temperaturze pokojowej, zawiesić komórki w pożywce, odwirować przy 300×g przez 3 minuty, odrzucić supernatant, ponownie zasiać komórki w świeżej pożywce.
Współczynnik podziału
od 1 do 5
Gęstość wysiewu
2–4 × 10⁴/cm²
Odnawianie płynów
Co 1–2 dni
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

06Kontrola jakości i kriokonserwacja

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

07Darczyńca

Wiek dawcy
Płód